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(山东中医药大学第二附属医院,济南 250001)

原因不明复发性自然流产(URSA)是指排除所有已知原因(包括内生殖器解剖、内分泌指标、遗传、感染、自身抗体等),连续3次或 3次以上的早期流产[1]。目前认为母体 Th1类细胞因子及 Th2类细胞因子与 URSA的发生、发展有关[2]。近年来,主动免疫治疗 URSA已取得良好效果。2006年 1月～2010年 6月,本研究观察了 URSA患者主动免疫治疗前后血清 IL-6、IL-10、TNF-α水平的变化。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 ①URSA组:URSA患者 50例。年龄 24～39岁,自然流产≥3次,孕 5～11周。 ②正常非孕组:妇科门诊要求取环、放环或妇科检查妇女共 50例,年龄 24～40岁。既往有生育史,无难免流产、早产、死胎死产等不良孕产史。③对照组:行药物流产或人工流产的妇女 50例,年龄 21～42岁。均有妊娠和分娩史,无死胎、死产或自然流产史。B超示胚胎发育正常。

1.2 主动免疫治疗方法 免疫原采用丈夫或健康志愿者淋巴细胞。抽取静脉血 20 ml,肝素抗凝,10 m l生理盐水稀释,混匀后分别放入含有淋巴细胞分离液的试管中,洗涤 1次,制成(3～4)×107/ml淋巴细胞悬液,于妻子臂内侧皮下注射 4～6点位。3周重复 1次,3次为 1个疗程,1个疗程后试孕,妊娠后巩固 1次。

1.3 血清 IL-6、IL-10、TNF-α的检测方法 采用ELISA法。分别于正常非孕组、对照组及 URSA组主动免疫治疗前、治疗 1个疗程后 2周、妊娠后孕50 d抽取外周血检测 IL-6、IL-10、TNF-α。

1.4 统计学方法 采用 SPSS17.0统计软件。计量资料用±s表示,用单因素方差分析(One-way ANOVA)。两两比较采用 SNK法。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 URSA组主动免疫治疗结果 URSA中,10例1个疗程后半年未孕。40例治疗后 3～6个月内妊娠,其中 30例在确定宫内妊娠后即巩固 1次,孕周≥28周治愈;1例孕 40 d宫外孕行手术治疗;9例又出现 URSA,其中 3例在确定宫内妊娠后予免疫治疗 1次,6例在行巩固治疗前流产。

2.2 URSA组治疗前后及正常非孕组、对照组血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比较 见表1。

表1 URSA组治疗前后及正常非孕组、对照组血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比较(±s)

表1 URSA组治疗前后及正常非孕组、对照组血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比较(±s)

注:与正常非孕组相比,*P＜0.05;与 URSA组治疗前相比,#P＜0.05;与对照组相比,△P＞0.05;与URSA组治疗后妊娠者、对照组相比,☆P＜0.05

组别 n IL-6(ng/L)IL-10(ng/L)TNF-α(ng/L)IL-6/TNF URSA组治疗前 50 3.94±0.03*0.18±0.02*3.21±0.38*1.24±0.18*治疗后 50 6.48±0.36#0.23±0.02#1.77±0.02#3.72±0.55#治疗后妊娠者 30 13.46±0.94△ 0.29±0.03△ 0.55±0.04△24.50±2.34△治疗后流产者 9 5.37±0.65☆ 0.18±0.01☆ 2.20±0.63☆ 2.63±0.83☆正常非孕组 50 5.58±0.40 0.21±0.03 1.86±0.13 3.02±0.23对照组 50 12.92±0.79 0.28±0.03 0.54±0.05 24.04±2.62

3 讨论

目前许多对辅助性T细胞(Th)的研究证实,Th1与 Th2之间的平衡对维持正常妊娠起重要作用。正常妊娠表现为 Th2现象,处于 Th1抑制状态[3]。

IL-6、IL-10同系 Th2型细胞因子。正常妊娠早期,IL-6通过自分泌或旁分泌调节胎盘激素的合成。IL-6低水平可能导致滋养细胞侵入表浅及胎盘血管形成障碍,最终导致妊娠失败[4]。IL-10是由蜕膜NK细胞分泌的 Th2细胞因子之一。IL-10与子宫内膜对胚胎植入的容受性形成有关[5]。Th2型细胞因子可抑制 Th1细胞因子介导的免疫应答,使妊娠得以成功进行[5]。

TNF-α系 Th1型细胞因子。低浓度的 TNF能促进胚胎发育。若妊娠期间异常分泌大量 TNF-α,可抑制蜕膜血管形成,严重影响胎儿生长,乃至引起流产和早产[6]。张昌军等[7]研究发现,Th2/Th1细胞因子偏倚在超促排卵过程即呈现出 Th1型细胞因子分泌重度抑制,Th2型细胞因子分泌轻度抑制的趋势;卵泡液 IL-6/TNF-α比值与胚胎质量、妊娠结局呈正相关。

本研究结果显示,URSA组治疗前与对照组相比,IL-6、IL-10水平降低,而 TNF-α水平升高。提示出现“Th1优势”而导致妊娠失败。URSA组主动免疫治疗后,IL-10水平上升,TNF-α水平下降,而该组治疗后再次流产者血清 IL-10水平降低,提示检测IL-10水平对妊娠结局的评估有一定意义。

本研究发现,URSA患者免疫治疗后,IL-6、IL-10水平上升,TNF-α水平下降,且治疗后成功妊娠者亦出现该趋势,IL-6/TNF-α比值明显上升,且 IL-6、IL-10、TNF-α水平与正常妊娠者相比无显著差异。提示主动免疫治疗可上调 IL-6、IL-10水平,下调 TNF-α水平,促使 Th1向 Th2转换,并进一步使妊娠获得成功。

[1]Costeas PA,Koumouli A,Giantsious-Kyriakou A,et al.Th1/Th2 cytokine genotypesare assotiated with pregnancy loss[J].Hum lmmunol,2004,65(2):135-141.

[2]Kayisli UA,MahutteNG,Arici A.Uterine chemokines in reproductive physiology and pathology[J].Reprod Immunol,2002,47(4):213-221.

[3]Beydoun H,Saftlas AF.Association of human leucocyte antigen sharingwith recurrent spontaneous abortions[J].Tissue Antigens,2005,65(2):123-135.

[4]张立.正常妊娠不同孕期血清 HCG及 IL-1β、IL-6和TNF-α水平的变化趋势[J].武警医学院学报,2008,10(17):865.

[5]邱丽华.原因不明复发性流产与 Th1/Th2型细胞因子[J].国外医学:计划生育分册,2000,19(1):20-23.

[6]IdrissHT,Naism i JH.TNF-alpha and the TNF receptor super family:structure function relationship[J].Micros Res,2000,50(3):184-195.

[7]张昌军,王华,周艳梅,等.白细胞介素 6及肿瘤坏死因子对体外受精胚胎移植结局的影响[J].郧阳医学院学报,2003,22(5):257-261.