高 倩，李 娜，贾景明

(沈阳药科大学，辽宁 沈阳 110016)

尼泊尔菊三七 Gynura nepalensis DC.为菊科菊三七属植物，以地上部位入药，为多年生草本植物，是我国最新发现的极具药用价值的珍贵物种。该植物中含有大量具有药理活性的生物碱、萜烯、苷类、黄酮、糖类、有机酸等化学成分[1]，其中黄酮类和多糖类成分具有明显的降血糖作用。其主要分布在尼泊尔、缅甸、不丹、锡金和我国的贵州、云南等地，生长于海拔1100～2100 m的地区，见于溪边岩石上和田边[2]。由于其对气候要求高，受繁殖方法和繁殖速度的影响，目前尚未人工引种栽培，而野生资源已远不能满足市场需求。离体快繁技术通常包括4个环节:无菌培养体系的建立，培养物的增殖，器官的分化，植株的生成和移栽[3]。笔者通过茎段诱导丛生芽建立的离体快繁体系能在短时间内提供优质种苗，实现人工大规模栽培，对开发该药用植物具有重要意义，报道如下。

1 材料和试剂

尼泊尔菊三七新鲜野生植株，采集于云南腾冲，经沈阳药科大学孙启时教授鉴定为尼泊尔菊三七。MS培养基，6－苄氨基嘌呤(6－BA)，萘乙酸(NAA)，蔗糖，琼脂，酒精，升汞。

2 方法与结果

2.1 外植体的准备

将3～6个月尼泊尔菊三七的幼嫩茎段用洗洁精清洗干净后，再用蒸馏水浸泡数小时，沥干水滴，备用。

2.2 外植体的灭菌与接种

将清洗好的尼泊尔菊三七茎段，放入烧杯中，用75%的乙醇溶液处理10～40 s，用0.1%的升汞溶液浸泡4～8 min，浸泡期间不断摇动，使灭菌剂升汞和外植体充分接触，进行表面消毒，再用无菌蒸馏水清洗5～6次，将经过消毒后的茎段切成0.5～1.0 cm且含有一个茎节的茎段，进行接种诱导正交试验，确定其最佳消毒时间。……