张兴虎,万文辉,齐玉琴,黄 方,范振芳,钱晓明

0 引 言

DC是已知体内功能最强的抗原提呈细胞,也是唯一能在体内直接激活初始(naïve)T细胞,促进 T辅助细胞和细胞毒性 T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的生成,并能促进 B细胞生成抗体的免疫细胞,DC处于启动、调控、维持免疫应答的中心环节。在对抗原的摄取、加工、处理及呈递过程中,DC具有一般的共性,同时也表达出一些特有的生物学特性。增龄引起的 DC功能下降减弱了机体免疫防御及免疫监视作用,致使老年人容易患感染、肿瘤和自身免疫性疾病[1]。国外已有人对普通老年个体单核细胞诱生的 DC(MoDC)细胞表面标志和免疫学功能做了一定研究[2],但对高龄老年个体外周血 MoDC未见有相应的报道。本研究应用流式细胞术,检测高龄老年人 MoDC细胞亚群和细胞表面标志的变化,探讨其在免疫衰老中可能的作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及设备 免疫荧光标记的三色人 DC检测试剂盒(3-color dendritic value bundle)购自美国Becton Dickinson公司,包括 FITC标记的 Lineage Cocktail 1(lin1,由 抗 CD3、 CD14、 CD16、 CD19、CD20、CD56单抗混合组成)、PE标记的抗 CD11c、PE标记的抗 CD123(抗 IL-3Rα)及 PC5标记的抗HLA-DR。流式细胞仪为BECKMAN COULTER公司的CYTOMICSFC500,分析软件 CXPAnalysis。HLA-DRFITC、CD1a-FITC、 CD40-FITC、 CD80-PE、 CD86-PE、CCR-7-FE、CD209-PE、同亚型对照抗体均购自BD-PharMingen公司;树突状细胞培养基 CellGro-DC购自 CellGenix公司;rhGM-CSF、rhIL-4购自上海飞捷公司;淋巴细胞分离液购自 TBD公司;MTT购自上海生工公司;OptiLyse C溶血剂购自 BECKMAN COULTER公司,倒置显微镜(Zeiss Axiovert 40)。

1.2 临床资料 观察组为高龄老年人 30例(≥80岁 ),平均(85.6 ±4.5)岁,其中男 21例,女 9例 ,排除有肿瘤、糖尿病、慢性感染、自身免疫性疾病、服用免疫抑制剂,并未接受免疫增强剂的治疗;普通老年人 30例作为对照组,年龄 60～70岁,平均(64.8±5.1)岁,其中男 18例,女 12例,条件同观察组。……