过氧化物酶体增殖激活受体γ或α在改善HepG2细胞糖代谢中的作用
2011-07-18宋璐璐萧建中邢小燕杨文英
宋璐璐 ,萧建中,邢小燕 ,张 敏,杨文英*
(1.北京协和医学院 研究生院,北京 100730;2.中日友好医院 内分泌与代谢病中心,北京 100029;3.北京大学医学部 研究生院,北京 100091)
过氧化物酶体增殖激活受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPAR)家族是一组经典的核受体,参与细胞能量代谢、炎症、增殖及分化的控制,尤其是糖脂的代谢。其中PPAR-α和PPAR-γ与代谢的关系更为密切。PPAR-γ主要在脂肪组织表达,也在肝脏、骨骼肌、胰腺及其它组织低表达[1]。主要调节脂质储存,促进糖代谢,抑制炎症及诱导脂联素的合成与分泌[2]。PPAR-α主要在脂代谢活动旺盛的组织表达,如肝脏、脂肪、肌肉等[3],是脂肪酸氧化的调节元件,参与脂肪酸代谢的调控,增加脂肪酸线粒体摄取和β氧化的基因表达,并且促进肝脏糖原合成和酮体的生成,参与脂蛋白的组装。在心脏,PPAR-α还参与糖脂代谢转换的调控[4]。
关于PPAR-γ或PPAR-α在人肝细胞糖代谢中所扮演的角色,尚缺乏直接的证据。HepG2细胞是一种常用的肝癌细胞株,兼具肝细胞和肿瘤细胞的特征,能够表达多种肝脏特异的功能,因此被用于研究肝细胞生理或者作为肝细胞代谢研究的体外模型,也是生物人工肝的细胞源之一,本研究探讨PPAR-α和PPAR-γ受体在HepG2细胞糖代谢调节中的作用。
1 材料与方法
1.1 材料
WY14643,吡格列酮和棕榈酸购自美国Sigma公司;牛血清白蛋白(不含游离脂肪酸)购自德国Cabiochem公司;葡萄糖测定试剂盒(北京康泰临床检验试剂);丙酮酸测定试剂盒和乳酸测定试剂盒 (南京建成生物科技有限公司);Trizol(Invitrogen,美国),Real time-qPCR 试剂盒(Toyobo,日本)。WY14643和吡格列酮溶于二甲基亚砜,棕榈酸按6.8:1的比例与不含游离脂肪酸的牛血清白蛋白共轭耦合。……
