杨静 罗岷 刘萍 方飞 刘昌权3△

（1.宜宾卫生学校药学教研室，四川 宜宾644000；2.宜宾卫生学校生理教研室，四川 宜宾644000；3.宜宾卫生学校内科教研室，四川 宜宾644000）

糖尿病慢性血管病变一直是患者早死及致残的首要原因，糖尿病患者心血管病的发生率也显著高于非糖尿病人群。血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cells，VSMC）的异常增殖迁移和表型改变是糖尿病慢性血管病变的主要病理学基础，而血管平滑肌的异常增殖可能与核因子－κB激活有关。小檗碱（Berberine）毛茛科植物黄连素根茎中所含的一种主要生物碱，可由黄连、黄柏或三颗针提取，也可人工合成一种抗菌性生物碱，疗效较确切。近年来大量动物实验研究发现小檗碱具有显著的降血糖影响［2］，在血管平滑肌细胞增殖方面也能产生抑制作用［3］。因此，本实验通过培养和建立糖尿病大鼠VSMC模型，观察小檗碱对大鼠VSMC的增殖及NF－κB核转移的影响，评价小檗碱体外抗糖尿病血管病变作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物

清洁级SD大鼠，雄性，体重200－240g，由泸州医学院实验动物科提供（合格证号：川医动字2401115）。

1.1.2 样品及试剂

小檗碱（陕西森弗生物技术公司，纯度99%，黄色结晶粉末）；链脲佐菌素（STZ）（美国Sigma公司，批号 S0130）；RPMI1640（GIBCO公司）；胰蛋白酶（美国Sigma公司）；胎牛血清（天津灏洋生物制品科技责任有限公司）；CCK－8（碧云天生物技术研究所）；免疫组化染色试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）；NF－κB激活－核转运检测试剂盒（碧云天生物技术研究所）；DAB显色剂（武汉博士德生物工程有限公司）。

1.1.3 仪器

倒置相差显微镜（日本Olympus公司，CKX41型）；……