苦参黄芪汤抗大鼠肝纤维化作用机制的研究
2011-07-09西安市第五医院内三科西安710082
李 荣 李 蓉 西安市第五医院内三科 (西安 710082)
苦参黄芪汤具有活血化瘀,兼以扶正、益气、清热解毒、利湿退黄等作用,在临床应用多年,能有效治疗肝炎及肝硬化早期患者,但机理不明。本实验为探讨此中药方剂抗大鼠肝纤维化作用的机制,做了以下研究。
1 材料和方法 1.1 药物和主要试剂 苦参黄芪汤由黄芪 30g,鸡血藤 15g,黄芩、苦参各 10g组成,由西安中药厂制成粉剂。其中每克粉剂含生药 2g。兔抗鼠 TGF-β1多克隆抗体、PDGF-BB及 CTGF多克隆抗体购自武汉博士德生物公司。免疫组化 ElivisionTM Plus广谱试制盒购自福建迈新公司。
1.2 实验分组与处理 清洁剂雄性 Wistar大鼠 60只,购自第四军医大学动物实验中心,平均为 180 g。随机分为 4组:正常对照组(15只),除正常饮食、饮水外,每日给予 0.9%氯化钠灌胃,皮下注射花生油,量同模型组;模型组(15只),按《中药药物实验方法学》用复合因素造模[1],实验第 1天皮下注射40%CCl4花生油溶液 0.5mL/100g体重,以后每隔 3d,皮下注射 40%CCl4花生油溶液 0.3mL/100g体重,以 79.5%单纯面粉、20%猪油及 0.5%胆固醇配成混合饲料,自来水为唯一饮料饲养动物。10周后处死大鼠,分别取心脏血及收集肝脏标本;中药组(30只),造模方法同上,造模的同时给予中药灌胃。中药组分为大、小剂量组,每组 15只,大剂量组:每日给中药粉剂量 2 g/100 g体重;小剂量组:每日给予中药 0.5 g/100 g。以上2组,每日用药 1次,共 10周。 10周后处理同上。
1.3 检测方法 取大鼠心脏血由同位素科专人用放射免疫法测定大鼠血清中肝纤维化指标 PCⅢ、CIV、HA、LN的含量。各组大鼠肝组织标本行 M ASSON三色染色,光镜下观察。由同一病理医生予以纤维化分级并行定量分析。……
