姚晓红 吴逸飞 王新 孙宏 钱彬 张博 汤江武

我国是菜籽粕产量居世界第一的国家，每年产量可达近千万吨。菜籽粕营养丰富，粗蛋白含量达35%～45%，同时含有较丰富的Ca、Mg、P、Se及多种营养物质，其中Se含量在植物性蛋白中含量最高[1]。菜籽蛋白几乎不存在限制性氨基酸，且其氨基酸组成接近联合国粮农组织（FAO）和世界卫生组织（WHO）推荐值，是优良的天然植物蛋白资源[2]。但由于菜籽粕中含有硫代葡萄糖苷（硫苷）、植酸等抗营养物质[3]，降低了蛋白质（氨基酸）的消化利用率，极大地限制了其在畜禽日粮中的应用。

国内外学者曾采用微生物发酵法对菜籽粕进行脱毒，取得了显著效果；同时研究还发现，菜籽蛋白经微生物降解后可得到低分子量的菜籽肽。菜籽肽具有低抗原性、酸溶性、低黏度等特点，且在体内消化吸收快，能有效提高菜籽蛋白利用率[4]。目前，单一依靠微生物发酵所得菜籽肽含量较少。因此，本研究在前期获得优良脱毒菌株及最佳脱毒工艺的基础上，以菜籽蛋白降解为目标，尝试在微生物发酵脱毒的基础上添加中性蛋白酶，进行菌酶协同酵解工艺研究，以期扩大菜籽肽得率，为进一步提高菜籽粕的利用率提供支持。

1.材料与方法

1.1 原料及菌种

菜籽粕购自绍兴中大饲料有限公司，粗蛋白含量≥32%，硫苷含量≥35 μmol/g；中性蛋白酶购自Sigma 公司，酶活 500 U/mg；枯草芽孢杆菌 B1（Bacillus subtilis－B1）为本实验室筛选获得的高效硫苷降解菌，于－4℃保藏于斜面培养基。

1.2 培养基

斜面培养基：牛肉膏 5 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g、琼脂 2%，pH 值 7.0～7.2，H2O 1000 ml。……