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猪繁殖和呼吸综合征病毒GP3蛋白糖基化位点突变株的构建及其生物学特性分析

2011-06-08刘欢欢周艳君姜一峰张善瑞童光志

中国动物传染病学报 2011年3期

刘欢欢,周艳君,姜一峰,张善瑞,童光志

(中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241)

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍、流产、死胎、木乃伊胎,仔猪发热、呼吸困难、腹泻、消瘦及高死亡率为特征的疾病[1]。2006年爆发的由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的“猪高热综合症”更是对中国养猪业造成了巨大损失,至今仍是影响中国养猪业最重要的疾病之一[2-5]。

PRRSV 为有囊膜的单股正链RNA病毒,基因组全长约15 kb,含有9个开放阅读框。ORF2-ORF7 分别编码病毒的结构蛋白 GP2a、GP2b、GP3、GP4、GP5、M 和 N。其中 GP5、M、N 为主要结构蛋白[6];GP2a、GP3、GP4、GP5为糖基化的囊膜蛋白。GP3 是 PRRSV 中糖基化程度最高的蛋白, 欧洲型和北美洲型 PRRSV之间, GP3 的氨基酸同源性为54%~60%[7]。分析预测显示GP3蛋白含有7个糖基化位点,这些糖基化位点在不同毒株间均很保守[8]。GP3 与 GP2a 与 GP4 形成异源三聚体包装入病毒粒子,缺失这三种蛋白的病毒粒子会失去感染性[9]。

病毒的糖基化与病毒对细胞的吸附,病毒在细胞中的转运及免疫原性等密切相关。经过糖基化修饰的蛋白在病毒感染时能介导病毒与宿主细胞融合(如副粘病毒的F蛋白),而且某些特定位点的糖基化与副粘病毒蛋白的生物活性密切相关[10]。糖基化修饰还能使病毒某些重要的抗原表位被糖链遮盖,引起病毒的免疫逃逸现象,如人免疫缺陷病毒的 gp120 糖蛋白,因糖基化位点上的糖链遮盖中和抗原表位导致中和抗体不能将其识别[11]。

研究表明突变不同的糖基化位点,会对病毒的拯救以及病毒在细胞上的生长造成影响。……

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