王丽非，朱元军，王松梅，杜郁，余腾斐，王丽，洪斌

干扰素（interferon，IFN）是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等活性的细胞因子，能通过多种机制影响肿瘤细胞功能，促进免疫细胞的活性[1]。干扰素是一个大的基因家族，可分为3 型，主要包括 IFNα、IFNβ 和 IFNγ[2]。IFNβ 主要用于病毒性疾病、恶性肿瘤和自身免疫性疾病的治疗[3]。1993年，美国 FDA 批准了 Chiron 公司生产的IFNβ-1b 上市销售，其商品名为Betaseron，用于治疗多发性硬化症、神经系统疾病。日本也批准了静脉注射的 IFNβ 用于治疗慢性乙型或丙型肝炎[4]。

尽管如干扰素、集落刺激因子等一些细胞因子已被开发成蛋白药物用于临床，但作为科研用试剂的细胞因子的开发在我国几乎是一片空白，高价进口和受制于西方生物技术公司成为细胞因子来源的主要现状。本工作在国家科技支撑计划——“科研用细胞因子试剂平台的完善和应用研究”的支持下，采用高效的宿主系统和载体表达标签化细胞因子——组氨酸标签人 β 干扰素（HIS-IFNβ），实现了可溶性表达，并利用 Ni sepharose 亲和层析的方法，分离得到高纯度的 HIS-IFNβ，并进行了生物学活性的检测，为科研用标签化细胞因子试剂的研制奠定了基础。

1 材料与方法

1.1 主要材料与仪器

1.1.1 菌株、细胞株、病毒株和质粒 大肠杆菌E.coliTG1、E.coliBL21(DE3) 为本实验室保存；人羊膜细胞（Wish细胞）购自中国科学院上海细胞中心；水泡性口膜炎病毒（VSV）为本研究所保存；质粒载体 pGEM-T 购自美国 Promega 公司；质粒载体 pET-16b 购自美国 Novogen 公司。

1.1.2 培养基 大肠杆菌培养基 LB 的配制参见分子克隆操作指南[5]；氨苄青霉素在 LB 培养基中使用浓度为100 μg/ml；……