应用凝集素芯片检测细胞膜表面糖链种属特异性
2011-06-08马汝海王天骄潘忠诚何群
中国医药生物技术 2011年1期
马汝海,王天骄,潘忠诚,何群
细胞膜表面糖复合物在构建复杂的多细胞器官和生物体中担任特别重要的角色,参与细胞之间以及细胞与其基质之间的相互作用,这些相互作用是多细胞生物发育和生物功能的关键环节[1]。
多细胞的个体发育和各种类型细胞的活化与聚糖结构改变有着密切联系,基于这一方面已经有大量文献报道。人们已经意识到在哺乳动物胚胎发育以及细胞活化过程中会发生细胞表面的糖基化改变,认为糖基化可参与细胞黏附、受体活化、细胞分化以及组织形态发生。但是关于在不同的相关物种中,相同糖蛋白是否具有相同类型的糖基化、相同的组织细胞膜是否具有相同类型的糖链这方面报道尚不多。
凝集素(lectin)是一类糖结合蛋白,能专一地识别单糖或寡糖中特定的糖基序列并与之结合,常用于寡糖和糖复合物的分离纯化和糖链的结构分析[2]。在本研究中,我们用构建的凝集素芯片分别对小鼠和兔的细胞膜表面糖链类型进行了检测,提取相同组织细胞并进行荧光标记,利用凝集素与糖链的亲和性捕获细胞,激光扫描仪扫描检测捕获细胞的凝集素位点,根据捕获得到的细胞膜表面糖链与凝集素特异亲和性的不同确定不同组织细胞膜的糖链类型[3],以探求不同物种间相同组织细胞膜的糖链特异性。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 雄性健康 C57 小鼠,均为6 周龄,体重 20~24 g;雌性健康大耳白兔,均为13 周龄,平均体重 2100 g。……
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