溃疡性结肠炎患者正常与病变肠段肠道菌群比较
2011-06-07林漫鹏郑雪玲
湖北民族大学学报(医学版) 2011年1期
刘 伟,刘 翔,林漫鹏,郑雪玲,杨 涛
广州医学院第二附属医院消化内科(广东 广州 510260)
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种慢性非特异性的炎症性肠病,其病因和发病机制尚不明确。目前多认为是由多种因素共同作用的结果,主要包括感染、免疫、遗传、精神及心理等因素,其中感染因素在UC发病中发挥重要作用,因此近年来对UC和肠道菌群之间的关系展开了大量的研究。肠道菌群失调对于UC的致病机制究竟有何意义尚不完全清楚,故本项目选取病变仅局限于乙状结肠以下的溃疡性结肠炎患者,分别在乙状结肠以上的正常肠段和乙状结肠以下的病变肠段用结肠镜取得活检标本,用PCR方法检测标本的细菌含量,从而比较正常肠段和异常肠段的菌群差异,以探讨肠道菌群失调在UC致病机制中的可能作用。
1 资料和方法
1.1患者入选标准溃疡性结肠炎患者40例,均为我院就诊的患者,均经结肠镜和病理学检查确诊,且病变均局限在乙状结肠及以下肠段。其中男性患者21例,女性患者19例,年龄16~83岁,平均年龄52岁,分别在病变肠段(乙状结肠以下肠道)及正常肠段(乙状结肠以上肠道)取粘膜组织做细菌学检查。另选40例正常对照,其中女性20例,男性20例,年龄18~75岁,平均年龄48岁,分别在乙状结肠以上肠段及乙状结肠以下肠段取粘膜组织做细菌学检查。
1.2材料和仪器DNA提取试剂购自广州达安基因,10×PCR buffer、dNTPs、Taq酶等购自Tiangen公司。常规的化学试剂为分析纯。生物安全柜Bioaer公司BSC-1500Ⅱ型,荧光PCR仪Biorad公司MJ Opticon2型。
细菌引物:上游通用引物BEL863f:CAGGATTAGATACCCTGGTAGTCC;……
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