赵泽赟,刘淑英,罗学东

绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)是引起绵羊肺腺瘤病(sheep pulmonary adenomatosis SPA)的病原,该病毒主要侵害肺脏[1]。SPA是一种慢性、进行性、接触传染性的肺脏肿瘤性疾病。该病主要以患羊咳嗽、呼吸困难、消瘦、大量浆液性鼻液、Ⅱ型肺泡上皮细胞和无纤毛细支气管上皮细胞肿瘤性增生为特征[2-3]。绵羊肺腺瘤病1825年首先发现于南非,目前,几乎所有养羊业发达的国家和地区,包括我国的新疆、内蒙、青海等省区都有该病的发生和流行,严重制约和影响着世界养羊业的发展[4]。此外,SPA与人类细支气管—肺泡癌(bronchiolo-alveolar carcinoma,BAC)在临床症状、病理组织学特征及超微病变方面极为相似,研究SPA病羊可作为研究人类BAC的理想动物模型[1]。绵羊肺腺瘤病毒是反转录病毒科β-反转录病毒属的成员之一,很多研究表明健康绵羊基因组中含有至少20拷贝与exJSRV相似内源性逆转录病毒(endogenous jaagsiekte sheep retrovirus,enJSRV)序列,并且exJSRV和enJSRV在结构和序列上同源性很高[5],在绝大多数区域同源性高达98%以上,但有 3个高可变区,分别位于 U3、env、gag区[6-7]。目前,因为该病在血液中检测不到循环抗体,所以不能用常规的血清学诊断方法,我国对本病一般通过流行病学、临床症状、病理组织学切片进行粗略的诊断,尚无快速、特异、灵敏的实验室诊断方法。

本试验在高可变区env基因的TM区和LTR的U3区分别设计了2套引物,采用巢式 RT-PCR技术对引起绵羊肺腺瘤病(SPA)的病原进行进一步的确诊,为建立特异性诊断该病的方法提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 样品来源及处理 样品来源于内蒙古呼和浩特市某种羊场自然感染JSRV的病例,经过病理解剖、病理组织切片观察,初步诊断为绵羊肺腺瘤病,取该病羊的肺脏、肾脏、肝脏、脾脏,小鼠、家兔的肺脏分别放在无RNase冻存管中于-80℃保存。……