国锦琳，唐远，裴瑾，万德光

（成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地 四川 成都 611137）

川木通类药材来源于毛茛科铁线莲属（Clematis spp.）植物的干燥藤茎，药典收载的法定品种为小木通Clematis armandii Franch.和绣球藤C.montana Buch.－Ham.［1］。该属植物我国分布有108种［2］，有些铁线莲属植物外形极为相似，在非花期时植株难以鉴别，经过药材加工后更加难以辨别，外观形状等常规鉴定较难区分，市场流通的川木通药材涉及该属10余种植物的藤茎，造成其品种混乱，影响到临床用药安全与疗效。因此，在开发利用本属药用植物资源时，应重视和加强对其品种的鉴定，以确保药材来源的正确性。

目前分子标记技术［3－9］已经在动植物的分类鉴定、遗传多样性分析方面发挥越来越多的作用，选择操作简单、稳定的分子鉴定技术进行中药材的分子鉴定成为研究热点。目前川木通类药材的分子鉴定尚属空白，我们选择随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）法确定序列特征性扩增区域（sequence characterized amplified regions，SCAR）标记，对川木通分子进行快速准确的鉴定，为开发川木通类药材的分子鉴定试剂盒奠定基础。

1 材料和方法

1.1 实验材料及试剂

本实验所使用的川木通原植物均为我们在四川省各地实地采集（表1）。植物叶片采集后或采用硅胶直接干燥，或直接编号后用液氮保存，再保存在－80℃冰箱备用。所采集植物均经万德光教授鉴定。

宿主菌E.coli JM109，E.coli Top10为本实验室保存。

Taq聚合酶购自上海申能博彩，dNTP、T4连接酶、琼脂糖及PMD18－T载体购自TaKaRa宝生物工程（大连）有限公司。……