官琳妹，蔡 鹏，汪 艳，于卫健

(1. 大连市友谊医院 检验科，辽宁 大连 116001；2. 辽宁国际旅行卫生保健中心 检验科，辽宁 大连 116001；3. 大连市红十字血液中心，辽宁 大连 116001)

人类白细胞抗原(HLA)，即人类主要组织相容性复合物(MHC)，是调控人体特异性免疫应答和决定疾病易感性个体差异的主要基因系统[1]。尿毒症是由各种原发或继发的肾脏疾病所引起。研究显示，成人慢性肾小球肾炎与HLA系统免疫机制强相关，HLA系统某些基因可能是中国人群易感慢性肾小球肾炎的风险因子[2-3]。本研究对大连市友谊医院511例等待肾移植的的慢性肾小球肾炎尿毒症患者HLA-DRB1基因分型与中国造血干细胞库大连HLA实验室健康捐献者的基因分型进行对比分析，探讨大连汉族慢性肾小球肾炎尿毒症与HLA-DRB1等位基因的相关性。

1 资料与方法

1.1 研究对象

病例组：2003年9月-2009年5月在大连市友谊医院等待肾移植的慢性肾小球肾炎尿毒症患者511例，均为汉族。其中，男性332例，女性179例，年龄18～61岁，平均39岁。 对照组：中国造血干细胞库大连HLA实验室健康捐献者共9678例，男性5243例，女性4435例，年龄22～58岁，也均为汉族。

1.2 试剂和仪器设备

Taq酶(大连 Takapa公司)， ABDR ssp UniTray Kit (美国DYNAL公司)，QIAamp DNA Blood Mini kit (美国 QIAGEN公司)，紫外透射分析仪 (上海天能科技有限公司)，ABI-9700PCR仪(美国ABI公司 )。

1.3 标本采集

清晨空腹抽取4 mL静脉血，枸橼酸钠抗凝后充分混匀。

1.4 DNA提取和扩增

采用美国 QIAGEN公司的QIAamp DNA Blood Mini kit试剂盒，严格按照说明书操作，提取DNA。

运用序列特异性引物聚合酶链反应法，采用美国DYNAL公司ABDR ssp UniTray Kit分型试剂盒，每孔加入配制好的反应体系10 μL，密封好后将微孔板放入ABI-9700PCR仪，按说明书调整循环次数和温度后，进行扩增。……