龚 慧，万慧芳，王美凤，涂 硕，余乐涵，杨晓红，万福生

(1.南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室，江西南昌 330006;2.南昌市第一医院护理部，江西南昌 330008)

牛磺酸(taurine，Tau)在生物体内参与一系列的生理学过程，如与胆汁酸结合、调节渗透压、细胞钙流动调节、抗氧化和抗心律失常等［1－3］。研究表明［2－3］，Tau 可下调缺血/再灌注(I/R)心肌和肝细胞内质网GRP78、减少细胞凋亡。研究也表明［4］，Tau对大鼠急性肾小管坏死、膜性肾病、糖尿病肾病、局灶节段性肾小球硬化等多种肾脏病具有防治作用，其确切机制尚未完全阐明。本实验拟在建立肾小管上皮细胞株NRK-52E细胞缺氧/复氧 (H/R)模型上，观察Tau对NRK-52E细胞H/R损伤的保护作用及其初步机制。

1 材料与方法

1.1材料与分组大鼠肾小管上皮细胞株NRK-52E细胞购自美国ATCC公司。取对数增长期的NRK-52E细胞，随机分为正常对照组、H/R组和H/R+Tau组，具体操作如下:① 正常对照组:正常培养的肾小管上皮细胞。②H/R组:取缺氧8 h/复氧12 h(以Caspase-12活性最强而定)。③ H/R+Tau组:于培养基中加入牛磺酸液(终浓度为10、20、40、80 mmol·L－1)，余操作同 H/R 组。

1.2NRK-52E细胞缺氧/复氧模型的建立从液氮罐中取出冻存的NRK-52E细胞投入37℃的水浴箱中，充分摇动使其尽快解冻，复苏。吸出细胞悬液并滴加10倍体积的含10%(V/V)新生牛血清的高糖 DMEM 培养基，混匀，1 000 r·min－1离心 5 min，弃上清液后再重复洗涤1次。用含10%牛血清的高糖DMEM培养基将细胞悬液稀释混匀，接种于50 ml培养瓶中，37℃下置入体积分数为5%的CO2细胞培养箱中静置12 h，换液除去未贴壁细胞。待细胞汇合80%后换成无血清的高糖DMEM进行同步化培养24 h，而后将培养瓶置于含95%N2-5%CO2(V/V)混合气体的密闭容器中(37℃)进行缺氧孵育8 h，再进行复氧孵育12 h。……