于霄 赵俊军 王波 李连宏 李平 唐建武 孙雷

1.大连医科大学中日临床病理中心，辽宁 大连 116044；

2.大连市中心医院，辽宁 大连 116033

1994年瘦素(leptin)和ob基因(obese gene)的发现，1995年leptin受体OB-R的成功克隆将leptin这一物质引入人们的视线。随着对leptin认识的逐渐加深，学者们发现，leptin不仅与肥胖症有关，也通过不同的信号通路及途径参与结肠癌、肝癌、口腔鳞癌、宫颈癌等恶性肿瘤进展过程［1-5］。血管生成对肿瘤的发展至关重要，研究表明leptin有促进血管生成的作用［6］。本实验采用免疫组织化学染色法检测甲状腺乳头状癌组织中leptin的表达情况及其与血管生成、淋巴结转移的关系。

1 资料和方法

1.1 资料来源

收集大连市中心医院病理科2003—2009年甲状腺乳头状癌组织标本58例(其中已发生淋巴结转移29例，未发生淋巴结转移29例)和甲状腺腺瘤组织标本26例。

1.2 切片及染色

选定标本经常规4%甲醛固定，将其切片，片厚约4 μm，切片经常规脱蜡、水化后，进行HE染色及免疫组织化学染色。

1.3 分组方法

根据病理诊断将标本分为甲状腺乳头状癌组、对照组(癌旁组、甲状腺腺瘤组)。

1.4 免疫组织化学染色

试剂：兔抗人leptin多克隆抗体ob购自Santa Cruz公司。鼠抗人CD105单克隆抗体和SP试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。免疫组织化学染色步骤按照SP法。

leptin阳性结果判定：参照许良中等［7］的免疫组织化学反应结果的判定标准，综合考虑切片中阳性细胞占所观察同类细胞数的百分比。阳性细胞百分比分为4级：≤5%为0分；＞5%～25%为1分；＞25%～50%为2分；＞50%为3分。根据显色程度判定阳性强度：基本不着色为0分；……