牛国梁 王辉 谢荣俊 张树友

南华大学附属南华医院普外科，湖南 衡阳 421002

乳腺癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一，对早期患者实行保乳治疗加放疗已是当今的总趋势。放疗正成为乳腺癌局部和区域治疗的重要手段，但肿瘤细胞本身对放射线的敏感性差、在放疗中存在放射抗拒等因素影响了放疗疗效，且放疗不良反应大。因此，寻找一种高效低毒的放疗增敏剂成为研究的热点。塞来昔布(celecoxib)是环氧化酶-2(cycloxygenase-2，COX-2)的选择性抑制剂，其具有高效低毒、胃肠道反应小等特点，研究发现塞来昔布不仅能抑制肿瘤的发生、发展，还能提高肿瘤放疗和化疗的敏感性，其确切机制尚不明确［1-2］。研究发现，PI3K/Akt信号通路在肿瘤的放射抵抗性中起重要作用［3］。本实验研究塞来昔布对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞放射敏感性的影响，并探讨塞来昔布是否通过阻断PI3K/Akt信号通路提高其放射敏感性。

1 材料和方法

1.1 材料及主要试剂

人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞由中国科学院上海生物化学与细胞研究所提供；PRMI 1640培养基、胰蛋白酶为美国GIBCO BRL公司产品；胎牛血清为杭州四季青公司产品；塞来昔布为美国辉瑞公司产品；四甲基偶氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)、碘化丙啶(PI)为Sigma公司产品；鼠抗人pAkt、Akt单克隆抗体、鼠抗β-actin单克隆抗体购美国Santa Cruz公司产品；羊抗兔二抗为北京中杉金桥生物公司产品；BCA蛋白定量检测试剂盒为美国Pierce公司产品；ECL发光检测试剂盒为联科公司产品。

1.2 细胞培养

人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞用含10%胎牛血清、100 U/mL青……