肖秀英 于宝华 王丽莎 倪淑娟 杨晓燕 朱玉芬

1.上海市徐汇区中心医院肿瘤科，上海 200031；

2.复旦大学附属肿瘤医院病理科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海 200032

近年来，随着人们生活水平的提高及生活习惯的改变，结直肠癌的发病率呈逐年上升的趋势。肿瘤的浸润与转移是恶性肿瘤的重要生物学特征，也是结直肠癌患者死亡的主要原因。作为细胞生长、增殖和抗凋亡的重要调节通路——PI3K/Akt信号转导在结直肠癌转移中的作用仍未完全阐明［1］。本研究采用免疫组化EnVison法同时检测结直肠癌原发灶及其相应转移灶组织中PI3K、p-Akt及mTOR的表达，探讨它们在结直肠癌转移中的作用及其潜在的临床应用价值。

1 资料和方法

1.1 资料

收集上海市徐汇区中心医院2007—2008年手术切除的结直肠癌原发灶及相应的转移灶标本各60例，均经病理证实为腺癌，术前均未接受放疗、化疗及免疫治疗。其中，男性33例，女性27例；年龄24～78岁，中位年龄52岁；发病部位结肠26例，直肠34例；肝转移灶2例，淋巴结转移病灶58例。根据WHO肿瘤组织学分类，高分化腺癌4例，中分化腺癌34例，低分化腺癌22例。另选10例癌旁正常结肠黏膜组织作对照。

1.2 组织标本的制备

将结直肠癌原发灶和转移灶组织蜡块标本收齐后制备成厚5μm连续切片，每块组织的连续切片中，均取一张做HE染色对照。

1.3 免疫组化检测

采用EnVision两步法，操作步骤严格按照说明书进行。PI3K(p110α)、p-Akt(Ser473)、mTOR(Ser2448)购于Cell Signal公司，均为兔抗人浓缩型单克隆抗体，工作浓度依次为1∶100、1∶50、1∶50。EnVision试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中杉生物技术开发公司。……