自发性高血压大鼠心脏中ACE，AT1R，ACE2和MasR表达变化的研究*

2011-05-24李鹏飞张源淑

中国应用生理学杂志 2011年2期

李鹏飞，张伟，马畅，张源淑

(南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室，江苏南京 210095)

肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system，RAS)是人类及其他哺乳动物心血管系统体液调节机制中的重要组成部分，其包括两个轴:血管紧张素转化酶-血管紧张素Ⅱ-ATI受体轴(Angiotensin converting enzyme-AngiotensinⅡ-ATI Gx-ACE-AngII-AT1轴)和血管紧张素转化酶-血管紧张素(1-7)-Mas受体轴(Angiotensin converting enzyme 2-Angiotensin(1-7)-Mas axis，ACE2-Ang(1-7)-Mas);前者主要是通过血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngII)引起血管收缩、血压升高、促进心肌细胞和血管平滑肌细胞增生等效应[1];后者作用与前者作用相反[2]。现在关于ACE-AngII-AT1轴的研究比较多，但是关于ACE2-Ang(1-7)-Mas轴及两条轴在高血压时是如何变化的研究比较少。本研究通过观察自发性高血压大鼠(SHR)和与之匹配的正常Wistar-京都大鼠(WKY)心脏组织中血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)，血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme，ACE2)表达的差异，并结合其相应受体AT1受体(ATR)和Mas受体(MasR)及血液中AngII的变化，从基因和蛋白水平上探讨R AS两条通路在高血压发病机制中的作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

AngII放免试剂盒(北京北方);Trizol试剂盒(南京天根);PCR引物(上海英骏);MMLV反转录酶、RNA抑制剂、随机引物(南京生兴)。SYBR Premix Ex Taq(南京博飞);BCA蛋白定量试剂盒(上海碧云天);ACE2(C-18)兔多克隆抗体(美国Santa Cruz)，羊抗兔IgG(武汉博士德)。

1.2 动物饲养与处理

14周龄雄性WKY和SHR各8只，体重300g左右(购于上海斯莱克实验动物有限公司，许可证号:SCXK沪2007-0005)。两组大鼠自由饮食，饲喂一周后用BSN-II多通道无创测压系统测定收缩压(systolic blood pressure，SBP)、舒张压(diastolic blood pressure，DBP)和心率(Heart rate，HR)，并称重后断头取血，迅速取其心脏放入液氮，随后转入-80℃待测。