赵 津，史中立Δ，齐万争，朱振龙

(1.河北医科大学解剖学教研室，2.附属第一医院病理科，石家庄 050017)

在地震、塌方造成的损伤中，肢体挤压伤占有较高的比例。解除挤压、恢复肢体供血是现场救治的首要步骤。然而，恢复供血所引发的缺血/再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)损伤，常导致保肢治疗失败甚至危及伤者生命。因此，防治肢体I/R损伤是整体救治的重要环节。我们前期的研究证实，吸入适量一氧化碳(carbon monoxide，CO)可显著减轻肢体I/R损伤及其引发的肝脏损伤，但所用动物模型的肢体缺血时间为4h，缺血程度相对较轻[1，2]。肢体严重缺血者，再灌注后常伴有血压下降甚至出现休克的表现，CO兼有舒张血管的效应，吸入CO对肢体严重I/R损伤有何影响尚缺乏研究。

1 材料与方法

1.1 主要实验材料

全自动生化分析仪LX-20(Beckman Coulter)，无创血压测量分析系统(成都仪器厂)，CO检测仪(FM2-MYJ型，北京中西器材公司)，OLYMPUS显微镜，UFX-DX显微照相系统(Nikon)。含CO的医用空气(CO的体积分数为0.075%，北京海温气体制造厂，气瓶编号 15564、03129、247114)，血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(北京中生生物工程高技术公司)。SD大鼠(清洁级)，由河北省实验动物中心提供(动物许可证号:冀504085)。

1.2 实验分组、肢体I/R动物模型复制及吸入CO的方法

雄性SD大鼠36只，体重220～250g，经实验室饲养7 d，待动物适应实验室环境后，将动物随机分为肢体 I/R12 h、10d组(n=8)、I/R12 h、10d吸入CO(RC)组(n=8)、假手术(S)组(n=4)。I/R 和RC12 h组，于再灌注12 h时取材，用于血清LDH、CK、肢体湿干重量比(wet/dry，W/D)和病理学指标的观测，I/R和RC10d组用于尾动脉压(caudal artery pressure，CAP)和 10d存活率的观测。S组，于假手术后12 h时取材，和I/R、RC12 h组对照实验。

I/R、RC组大鼠在6%水合氯醛(0.3 g/kg ip)全麻状态下，剪毛消毒，切开皮肤，在双侧后肢根部分离暴露股动脉，无创血管夹将其夹闭，缝合创口，用橡皮筋绑扎后肢根部，使后肢缺血8 h，去除血管夹及橡皮筋行再灌注，以此复制肢体严重I/R损伤模型。……