杨星飞，张雪鹏*，赵光明，孙 影，韩 旭

(1河北联合大学附属医院，河北唐山063000;2河北联合大学基础医学部病理教研室)

乳腺癌是妇女最常见恶性肿瘤，近年来其患病率有升高趋势。以往判断乳腺癌患者预后的指标有肿瘤大小、临床分期、组织学分类与分级及淋巴结转移等。近年研究发现，表皮生长因子受体(EGFR)参与乳腺癌的发生，发展。解聚素—金属蛋白酶17(ADAM-17)是新近发现的ADAM蛋白家族成员，是EGFR 的配体［1～3］。为探讨 ADAM-17 在浸润性乳腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系，我们进行了相关研究。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2008年10月～2010年1月在河北联合大学附属医院行乳腺癌切除手术的108例女性患者的癌组织标本，患者年龄22～77岁、中位年龄45岁，术前均未进行放、化疗及免疫治疗。依据2003年WHO制定的乳腺癌组织学分类，诊断为非特殊型浸润性导管癌82例，非特殊型浸润性小叶癌13例，特殊型浸润性乳腺癌13例;82例导管癌的组织学分级为Ⅰ级32例、Ⅱ级36例，Ⅲ级14例。有淋巴转移52例。根据国际抗癌协会制定的TNM分期，临床分期为Ⅰ期36例、Ⅱ期49例、Ⅲ期23例。患者行病灶切除手术后，切取其肿瘤组织20 g左右，迅速冻存于－80℃冰箱中。

1.2 检测方法 应用免疫印迹方法检测癌组织中的ADAM-17蛋白表达，分别取冻存乳腺癌组织65 mg，称重、粉碎，低温下 1 2000 r/min、4 ℃ 离心 20 min，取上清液。实验设标准管、样品管、空白管，在波长650 nm条件下测定总蛋白的OD值后计算出其浓度。取50 μl蛋白样品，7.5%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，150 V、1.5 h。转膜至聚偏氟乙烯膜上，用TBS液洗膜，5%脱脂奶粉封闭1 h。……