李婷，李成，张开礼，冯廉洁，罗意文，陈连剑（深圳市福田区人民医院，深圳市 518033）

复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水是我院制剂室自行研制的一种外用溶液剂，以达克罗宁和薄荷脑为主药，乙醇和甘油为辅药，用于治疗秋冬季节皮肤干燥、瘙痒，以满足我院皮肤科门诊日益增多的秋冬季节皮肤干燥、瘙痒患者，尤其是中老年患者的需要。本制剂具有以下优点：外用溶液可方便患者浴后大面积涂抹，局部用药可避免口服给药的副作用，利于患者整个季节的长期给药；制剂中选用的主药与辅料外用时几乎没有毒副作用，避免了传统药物激素类的严重不良反应，使用后不仅瘙痒感消失，且自觉皮肤清凉、滋润、舒适，避免了软膏剂或乳膏剂使用后的油腻不适感觉，大大提高了患者的顺从性，从而保证了治疗的成功率；将保湿润肤与止痒作用相结合，对秋冬季节皮肤干燥、瘙痒起到标本兼治的作用；主药和辅料在药理上和药剂上均无禁忌，处方中的20%乙醇具有皮肤散热、清凉作用和一定的促渗作用。为有效控制该制剂质量，笔者参考相关文献[1～5]，并根据达克罗宁和薄荷脑的理化性质，建立了以高效液相色谱（HPLC）法测定制剂中达克罗宁的含量、旋光法测定薄荷脑的含量的方法，以及其他指标控制的方法。结果表明，该制剂制备工艺简单、质量可控。

1 仪器与试药

1.1 仪器

LC-20AD HPLC仪，包括SPD-20A紫外检测器、CTO-10AS VP柱温箱、Phenomenex lune色谱柱、SIL-20AL自动进样器、UV-2201紫外分光光度计（日本岛津公司）；WZZ-1型自动指示旋光仪（上海物理光学仪器厂）；AG285电子天平（瑞士梅特勒公司）。

1.2 试药

达克罗宁（盐酸盐，杭州良金生物科技有限公司，批号：2091203，含量：99.9%）；达克罗宁标准品（盐酸盐，批号：100423-200901，含量：100%）、薄荷脑标准品（批号：100728-200506，供含量测定用）均由中国药品生物制品检定所提供；薄荷脑（上海新华香料厂，批号：20091203，含量：99.9%）；复方达克罗宁薄荷脑润肤止痒水（自制，批号：20090726-1、20090726-2、20090726-3，规格：每瓶100 mL，含量：达克罗宁0.5%、薄荷脑0.2%）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 处方与制备

2.1 处方

达克罗宁0.5 g，薄荷脑0.2 g，乙醇20 mL，甘油30 g，水加至100 mL。

2.2 制备

取薄荷脑溶于乙醇中，搅拌溶解，加入适量水、甘油搅匀，加入达克罗宁搅拌溶解，再加水至100 mL，搅匀，即得。

3 质量控制

3.1 性状

本品为无色的澄明液体，有薄荷脑及乙醇的特殊香气，味初灼热后清凉。

3.2 鉴别

达克罗宁：在“3.4.1”项下记录的色谱中，供试品溶液主峰的保留时间与标准品溶液主峰的保留时间一致。

薄荷脑：取本品少许，加硫酸2滴与香草醛结晶数粒，渐显红紫色，加水数滴，即显紫堇色。

3.3 检查

应符合2010年版《中国药典》二部“洗剂”项下有关的各项规定[6]。

3.4 含量测定

3.4.1 达克罗宁。

（1）溶液制备。精密称取达克罗宁标准品20.13 mg，置于100 mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.2013 mg·mL－1的标准品溶液；精密量取样品1 mL，置于100 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液；按处方比例称取除达克罗宁外的其他成分，按该制剂制备工艺制成空白制剂，其余按供试品溶液制备方法进行，即得空白样品溶液。

（2）检测波长的确定。精密量取标准品溶液3 mL，置于10 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，以流动相为空白，在190～400 nm波长范围内扫描，结果达克罗宁在279 nm波长处有最大吸收，薄荷脑及辅料在此波长处无干扰，故选择279 nm作为检测波长。

（3）色谱条件与系统适用性试验。色谱柱：Phenomenex luna（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水-三乙胺-冰醋酸＝55∶43.5∶1.0∶0.5；流速：0.5 mL·min－1；检测波长：279 nm；进样量：10 μL；柱温：30 ℃。

取标准品溶液、供试品溶液和空白样品溶液进样分析，结果以盐酸达克罗宁计理论板数不低于3000，主峰与相邻色谱峰的分离度不小于1.5，详见图1。

图1 高效液相色谱图A.空白样品；B.标准品；C.供试品；1.达克罗宁Fig 1 HPLC chromatogramsA.blank sample；B.standard substance；C.sample；1.dyclonine

（4）标准曲线的制备。精密量取达克罗宁标准品溶液1、2、3、4、5、6 mL，分别置于10 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。分别取10 μL进样，各浓度进样3次，以浓度（c）对峰面积（A）进行线性回归。得回归方程：A＝65692.96c－40105.4（r＝0.9995，n＝6）。结果表明，达克罗宁检测浓度线性范围为20.13～120.78 µg·mL－1。

（5）精密度试验。取同一浓度标准品溶液，连续进样5次，每次10 μL，记录峰面积，计算得其含量的RSD＝1.4%（n＝5），表明方法精密度良好。

（6）稳定性试验。取供试品溶液，在12 h内每2 h测定1次，结果，峰面积值的RSD为1.8%，表明该溶液在12 h内稳定。

（7）加样回收率试验。精密量取已知含量的同一批样品溶液5 mL各6份，置于10 mL容量瓶中，分别加入60%、100%、140%的达克罗宁标准品，加流动相稀释至刻度，依法测定，按上述回归方程计算含量及低、中、高浓度的平均回收率，结果见表1。

（8）样品中达克罗宁含量测定。精密量取样品1 mL，置于100 mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，取稀释液10 μL进样，记录色谱；另精密称取达克罗宁标准品适量，用流动相溶解并稀释成约50µg·mL－1，同法测定。按外标法以峰面积计算出样品中达克罗宁的含量，结果分别为标示量的99.5%、99.6%、100.2%（n＝3）。

表1 达克罗宁回收率试验结果（n＝6）Tab 1 Results of recovery tests of dyclonin（en＝6）

3.4.2 薄荷脑。

（1）标准曲线的制备。精密称取薄荷脑标准品适量，加水制成浓度为1.13 mg·mL－1的溶液，然后精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。按照2010年版《中国药典》旋光法[4]，用2 dm旋光管，于（20±0.5）℃测定其在589.3 nm波长下的旋光度，以旋光度（α）与浓度（c）建立回归方程。得回归方程：α＝86.46c+0.012（r＝0.9998）。结果表明，薄荷脑检测浓度线性范围为1.13～5.65 mg·mL－1。

（2）稳定性试验。取薄荷脑标准品溶液放置0、1、2、4、8、12 h后测定其旋光度，结果基本不变，RSD＝0.12%，表明该溶液在12 h内稳定。

（3）精密度试验。取批号为20090726-1的样品重复测定其含量，结果测得含量的RSD为0.6%。

（4）回收率试验。分别精密称取薄荷脑适量，按处方比例模拟制备成3种不同浓度（80%、100%、120%）的制剂各2份，依法测定，按上述回归方程计算含量及低、中、高浓度的平均回收率，结果见表2。

表2 薄荷脑回收率试验结果（n＝6）Tab 2 Result of recovery tests of mentho（ln＝6）

（5）样品中薄荷脑含量测定。直接取样品溶液，用2 dm旋光管，于（20±0.5）℃依法测定旋光度，用回归方程计算含量，结果3批样品含量分别为标示量的100.1%、99.8%、99.6%（n＝3）。

4 讨论

达克罗宁作为表面麻醉剂，在处方中具有止痛、止痒及杀菌作用；薄荷脑在处方中主要是清凉止痒作用；30%甘油在处方中主要是保湿作用；20%乙醇在处方中主要是清凉、促渗作用。

HPLC法测定达克罗宁的色谱条件中，若设定流速为0.5 mL·min－1，保留时间可达到 7.363 min，如设定为 1.0 mL·min－1，则保留时间小于5 min；进样量如为20 μL，则样品峰太高，进样量为10 μL，峰高适宜；本次试验以达克罗宁峰计理论板数为9305，拖尾因子为1.2（采用峰面积法），满足分析要求。本试验结果表明，采用HPLC法测定制剂中达克罗宁的含量，方法简便、快速、准确；采用旋光法测定薄荷脑含量，操作简便，结果准确，仪器简单，适用于该制剂的快速分析。因此，本文建立的方法可作为该制剂的质控方法。

[1]郭 珉，李珠华，赵远征，等.HPLC法测定芩宁软膏中黄芩苷及盐酸达克罗宁的含量[J].医药导报，2006，25（5）：469.

[2]杨跃龙.RP-HPLC法测定复方达克罗宁软膏中主药的含量[J].中国药房，2008，19（4）：294.

[3]章国钧.上海市医院制剂手册[M].第3版.上海：上海科学技术出版社，1995：87-88.

[4]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：395-396、附录41.

[5]夏新中，李万江，卢 静，等.气相色谱法测定皮炎平软膏中薄荷脑的含量[J].长江大学学报，2008，9（5）：65.

[6]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：附录18.