西罗莫司血药浓度测定方法的建立及在肝移植患者中的应用
2011-05-21吕慧怡
张 宁,吕慧怡*,邓 卅,范 青
西罗莫司(Sirolimus,SRL,商品名 Rapamune,雷帕霉素),是一种大环内酯类免疫抑制剂,具有抗增殖、抗肿瘤及无肾毒性等特性,近年来逐渐应用于肝移植患者,使临床获得了防治肝移植术后肾功能不全、慢性排斥反应、肿瘤复发和提高移植物长期存活的新途径[1]。血药浓度监测对于保证SRL免疫抑制效果和临床安全性具有重要的意义。本文采用高效液相色谱法测定西罗莫司血药浓度,并分析此方法在肝移植患者中的合理应用。
1 实验材料
1.1 仪器 日本岛津HPLC色谱仪(LC-20AT二元梯度泵,COM-20A控制模块,SPD-M20A二极管阵列检测器),QT-330型色谱柱恒温箱(大连三杰科技发展有限公司),wi2568529电动离心机(东仪科技有限公司),AS701KDT型超声波清洗器(北京鸿泰顺达科技有限公司),XY-22型浓缩氮吹仪(青岛新益通有限公司),YKH-Ⅱ 型液体快速混旋器(江西医疗器械厂),AW-120型分析天平(日本岛津)。
1.2 药品与试剂 西罗莫司对照品(纯度为98.0%,天津新美科技有限公司),32-去甲基雷帕霉素(纯度为98.0%,天津新美科技有限公司),甲醇(色谱纯,天津康巢正兴科技发展有限公司),氢氧化钠(分析纯,上海慈太龙实业有限公司),乙腈(色谱纯,天津市康巢科技开发有限公司),硫酸锌(分析纯,上海光铧科技有限公司),1-氯正丁烷(≥99.5,广州伟伯化工有限公司)。
2 实验方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:Hypersil ODS C18柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm,大连伊利特分析仪器有限公司);流动相:乙腈-甲醇-水(7.5∶62.5∶30);流速:1.2 mL/min;紫外检测波长:276 nm;进样量:20 μL;柱温:50℃;内标物:32-去甲基雷帕霉素。在上述色谱条件下,全血中内源性杂质不影响西罗莫司与内标的分离测定,西罗莫司与内标的保留时间分别为16.3、26.8 min,空白全血、对照品及全血样品色谱图,如图1。……
