乔 帅，王明凤，杨文博，许 君，郑文明

(河南农业大学生命科学学院，河南郑州450002)

MADS是由4种蛋白质因子MCM1(酿酒酵母)、AGAMOUS(拟南芥)、DEFICIENS(金鱼草)和SRF(人类)的首写字母构成［1］.MADS-box家族基因编码多种具有重要生物学功能的转录调节因子［2，3］.在植物中 MADS-box 基因调节根、叶、花和果实的发育，特别是在植物的花分生组织和花器官发育中具有不同形式的时空表达模式［4～6］.MADS-box基因广泛分布于拟南芥、金鱼草、矮牵牛、烟草、番茄和油菜等双子叶植物以及玉米、水稻、小麦和高粱等单子叶植物中［7，8］;MADS-box 家族转录因子的功能涉及到植物生长发育的各个方面，决定着植物的产量、品质、抗逆等多种农艺性状，MADS-box转录因子的功能鉴定对寻找MADS-box转录因子上下游的关键调控因子，并通过调控它们的表达来达到提高作物产量、品质、抗逆性状具有重要意义［9］.拟南芥基因组编码MADS-box家族转录因子107 个，包括 5 个基因亚家族［10，11］.AGL47 是拟南芥第5条染色体上At5g55690基因编码的转录因子，属于 MADs-box 蛋白家族 Mβ 亚家族［12～15］.ROSA等［16］的研究结果显示，拟南芥AGL47转录因子受到磷饥饿特异性正调控，极有可能在磷代谢中发挥关键性的作用.本研究利用表达载体pPET-28a在大肠杆菌中实现了AGL47融合蛋白的表达，但以包涵体的形式存在.通过对包涵体的纯化，变性和复性后，初步获得了可溶性目的蛋白，为进一步研究AGL47转录因子的功能奠定了重要基础.

1 材料与方法

1.1 材料

工程菌 E.coli DH5α 和 E.coli BL21(DE3)表达载体pET-28a由河南农业大学生命科学学院微生物实验室保存;At5g55690全长CDS克隆pENTR-At5g5569 为前期研究构建［14］.

限……