贾 科，吴庆琛，张 成

(1.重庆医科大学 附属第一医院，重庆 400016;2.川北医学院 附属医院，四川 南充 637000)

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一，其发病率位居各类肿瘤的首位，胃癌的治疗除了手术、放疗和化疗外，中医药治疗也越来越受到人们的关注[1]。重楼为百合科植物云南重楼或七叶一枝花的干燥根茎，主产于云南、四川及贵州等地[2]。现代药理研究显示重楼除了具有消炎、抑菌、镇静等作用外，还具有显著的抗肿瘤作用[3]。据报道，重楼的水提物、甲醇提取物和乙醇提取物对多种肿瘤细胞均有抑制作用，而皂苷是其主要药效成分[4]。本实验研究重楼总皂苷对胃癌细胞株MGC-803生长的抑制作用，并探讨其作用机制。

1 材料

重楼药材由重庆医科大学附属第一医院中药房提供，符合《中国药典》(2005版一部)的规定。

RPMI 1640培养基，美国Gibco公司;四甲基偶氮唑盐(MTT)，美国 Sigma公司;survivin、Caspase-3兔抗人多克隆抗体和免疫组织化学二抗试剂盒，北京中杉金桥生物技术有限公司;EphA2兔抗人多克隆抗体，Santa Cruz公司;流式细胞术二抗，Jackson Immunoresearch Laboratiries Inc公司;胎牛血清、胰蛋白酶、二甲基亚砜(DMSO)，北京华美公司。

人胃癌细胞株MGC-803，重庆市肿瘤研究所提供。

NAPCO series 5400 CO2培养箱，美国Nuair公司;Elx酶标仪，Bio-TEK-Instuments Inc;EPICS XL流式细胞仪，美国COULTER公司。

2 方法

2.1 重楼总皂苷的制备

重楼药材50 g，粉碎，加70%乙醇500 mL回流3 h，提取2次，合并滤液，减压浓缩除去乙醇。加水悬浮，依次用石油醚、乙酸乙酯除去亲脂性的成分，再用正丁醇萃取、浓缩得重楼总皂苷[5]。烘干称重，得0.4865 g，即每1 mg重楼总皂苷相当于重楼药材 0.103 g。

2.2 细胞培养

常规培养于含10%胎牛血清、100 u/mL青霉素和0.1 mg/mL链霉素的RPMI 1640培养液中，置37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱中培养24 h，传代后取对数生长期细胞用于实验。……