苏婕吴原吴月娟马美刚唐玉兰余璐刘云李佳荃

·论 著·

体外培养癫痫细胞模型中整合素α2表达的变化☆

苏婕*吴原*吴月娟*马美刚*唐玉兰*余璐*刘云*李佳荃△

目的 探讨体外培养癫痫细胞模型中整合素α2（integrin α2）的动态表达变化及意义。方法 体外培养至第7天的乳鼠海马神经元分成对照组和实验组，实验组利用“无镁细胞外液”体外培养3 h制备体外癫痫神经元细胞模型，免疫细胞化学法和逆转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法测定对照组及实验组造模后12 h，24 h，48 h三个时间点的integrin α2蛋白及mRNA的相对表达变化。结果 造模24 h后神经网络迁移，呈 “网格样”改变；integrin α2蛋白相对表达：平均光密度值（mean integrated optical density，mean IOD）对照组为（0.033±0.005），实验组12 h（0.084±0.033），24 h（0.076± 0.018），48 h（0.077±0.006），实验组均高于对照组（P＜0.05），在造模后12-48 h表达量维持在两倍以上；RT-PCR结果示对照组integrin α2与β-actin光密度值（optical density，OD）之比为（0.316±0.039），实验组12 h（0.435±0.067），24 h（0.453±0.046），48 h（0.515±0.054），不同时间实验组与对照组相比，integrin α2 mRNA表达均显著提高（P＜0.05）。结论 Integrin α2在体外培养乳鼠海马癫痫神经元中表达增加，推测integrin α2可能参与了细胞持续自发性放电后神经网络的重组过程。

整合素α2 神经网络 无镁液 癫痫细胞模型

癫痫的发病机制尚未完全明确，目前神经网络学说正受到普遍关注［1］。研究证实，难治性癫痫患者中，一系列的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）分子表达呈上调趋势，并诱发齿状回苔藓纤维出芽，形成异常突触联系［2－3］。而整合素（integrins）是层粘连蛋白 （laminin）等ECM分子的主要受体之一，参与了多种正常细胞及肿瘤细胞的迁移过程［4］。Integrins是由α和β组成的异二聚体结构，integrin α2是α亚单位的亚型之一。本实验通过建立小鼠难治性癫痫细胞模型，并以正常体外培养的神经元为对照组，对integrin α2的蛋白和mRNA表达水平进行检测，探讨其与神经元异常网络形成的关系及在难治性癫痫发病机制中的作用。……