厉宗祥，曾现伟，季泰令，潘 顺

(1潍坊医学院，山东 潍坊 261042;2潍坊医学院附属医院)

脑膜瘤多为良性肿瘤，生长缓慢，约0.9% ～10.6%的脑膜瘤呈恶性并具有侵袭性，术后复发率高。2005年3月～2010年1月，我们采用免疫组化SP法检测脑膜瘤组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)的表达，旨在进一步探讨其在脑膜瘤发生、发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料 选取潍坊医学院附属医院手术切除的脑膜瘤组织标本35份，患者男14例，女21例;年龄2～73岁，平均50岁。均经病理证实，且符合WHO关于中枢神经系统肿瘤的分类标准［1］。参考病理结果及影像资料，将脑膜瘤分为恶性脑膜瘤15份(恶性组)，良性脑膜瘤20份(良性组)，两组一般资料无统计学差异。试剂:小鼠抗人TIMP-2单克隆抗体，工作浓度1∶100;兔抗人MMP-2多克隆抗体，工作浓度1∶100;IgG-1/2KITSABC小鼠/兔免疫组化试剂;DAB试剂盒。以上试剂均购自北京中杉生物技术公司。

1.2 MMP-2、TIMP-2表达检测 所有组织标本均经10%中性甲醛固定，常规脱水后石蜡包埋，4 μl厚连续切片进行免疫组织学染色。采用免疫组化SP法，切片常规至水，微波修复抗原，3%H2O2灭活内源性过氧化物酶，正常血清封闭，滴加一抗，浓度为1∶100，4℃过夜。DAB显色，苏木素复染，梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封片。结果判断标准:MMP-2和TIMP-2的免疫着色部位均为胞质和胞膜，以胞质或胞膜呈均一棕黄色颗粒者为阳性，无棕黄色着色颗粒的细胞为阴性。在×400视野下计数200个肿瘤细胞核范围为一个视野，计算5个视野免疫反应阳性细胞百分比平均值。每张玻片先经一人观察，另一人复查。根据阳性肿瘤细胞占所有肿瘤细胞的比率，记录为半定量结果:未染色为(-)，阳性细胞5% ～20%且染色强度较弱为(+)，21～50%且染色强度中等为(++)，＞50%且染色强度较强为(+++)。分析 MMP-2与TIMP-2表达的相关性。

1.3 统计学方法 采用SPSS16.0统计软件，应用χ2检验，两指标在脑膜瘤中的相关性采用Spearman等级相关分析法。检验水准α=0.05。

2 结果

恶性组及良性组MMP-2阳性表达率分别为73.3%(11/15)、15%(3/20)，TIMP-2 阳性表达率分别为13.3%(2/15)、80%(16/20)，两组比较 P 均＜0.01。脑膜瘤中MMP-2与TIMP-2表达呈负相关(r=-0.545，P ＜0.01)。

3 讨论

脑膜瘤是中枢神经系统常见肿瘤之一，其人群发生率为6/100000，约占颅内原发肿瘤的20%［2］。其中女性多于男性，生育期(30～50岁)患者约占80%，而在儿童中少见。脑膜瘤多为良性肿瘤，常与硬脑膜粘连并可侵犯硬脑膜，生长缓慢，约0.9% ～10.6%的脑膜瘤呈恶性并具有侵袭性生物行为，恶性脑膜瘤发病年龄轻、病程短，病情进展迅速［3］。术前CT、MRI检查可确诊大多数脑膜瘤，但鉴别其良恶性较困难。恶性脑膜瘤治疗困难，术后复发率高。

Ⅳ型胶原是硬脑膜的关键成分，起硬脑膜屏障作用，能抵抗炎症或肿瘤造成的吸收和破坏。MMP-2、MMP-9以细胞外基质中的Ⅳ型胶原为主要底物，与肿瘤的侵袭和转移密切相关。TIMPs是机体内存在的MMPs特异性抑制剂，是一组多基因家族的编码蛋白，目前已克隆出4种，分别为TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3 和 TIMP-4［4］。它们能与 MMPs 形成复合抑制物抑制MMPs，下调MMPs细胞外基质降解活性，抑制肿瘤血管生成，从而抑制瘤细胞的侵袭性［5，6］。本研究恶性组MMP-2阳性表达率高于良性组，TIMP-2阳性表达率低于良性组，P均＜0.01;脑膜瘤中MMP-2与TIMP-2表达呈负相关。表明从良性脑膜瘤并进一步转变为恶性脑膜瘤的过程中，MMP-2表达增多，TIMP-2表达减少均在其中起着一定的作用，参与了脑膜瘤的恶变过程。

总之，MMP-2可作为判断肿瘤恶变的指标，TIMP-2可作为肿瘤非恶变的指标。其可对脑膜瘤预后评估、治疗方法有指导作用。

［1］张福林，李振新.应用WHO神经系统肿瘤新分类使脑肿瘤诊断规范化［J］.中国神经精神疾病杂志，2001，27(2):151-152.

［2］王忠诚.神经外科学［M］.武汉:湖北科学技术出版社，2005:587-588.

［3］Carrasco JR，Jacqueline R，Penne RB，et al.Optic nerve sheath meningiomas and advanced treatment options［J］.Current Opinion Ophthalmology，2004，15(5):406-410.

［4］Velasco G，Lopez-Otin C.Strategies for cloning new MMPs and TIMPs［J］.Methods Mol Biol，2001，(151):25-44.

［5］Zucker S，Hymowitz M，Conner C，et al.Measurement of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases in blood and tissues［J］.Ann NY Acad Sci，1999，(878):212-217.

［6］Liotta LA，Steeg PS，Stetler-Stevenson WG.Cancer metastasis and angiogenesis:an imbalance of positive and negative regulation［J］.Cell，1991，64(2):327-336.