孙利伟，赵 辉，蔡楠楠

（1.河南省新乡市中心医院，河南 新乡 453000； 2.河南大学药学院，河南 开封 475004）

杜仲为杜仲科植物杜仲 Eucommia ulmoides Oliv.的干燥树皮[1]，是我国独有的古老珍贵经济树种，绿原酸为其主要有效成分之一[2]。笔者采用正交试验法，以杜仲中绿原酸的含量为考察指标，确定最佳提取工艺，现报道如下。

1 仪器与试药

LC－2010A型高效液相色谱仪，岛津UV检测器（日本岛津）；101－2AB型电热鼓风干燥箱（天津泰斯特仪器有限公司）；N－1001S型旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）；KQ5200DA型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。杜仲采自灵宝市中国林科院经济林研究开发中心，经河南大学李钦教授鉴定为杜仲科植物杜仲 Eucommia ulmoides Oliv.；绿原酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号为0753－9910）；乙腈（色谱纯，merck公司）；甲醇（色谱纯，天津四友精细化工试剂厂）；水为重蒸水。

2 方法与结果

2.1 绿原酸含量测定

2.1.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil－C18柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇－水－冰醋酸（17∶83∶1.5）；流速：1.0 mL/min；检测波长：237 nm；柱温：25℃；进样量：20μL。在此条件下色谱图见图1，绿原酸保留时间为31.17min。

图1 高效液相色谱图

2.1.2 溶液配制

精密称取绿原酸对照品4.70mg，置10mL容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为对照品溶液，备用。取本品约1 g，剪成碎片，揉成絮状，精密加入溶剂50mL，称定质量，按试验要求（超声或回流）处理，放冷至室温，再称定质量，用50％甲醇补足减失的质量，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

2.1.3 方法学考察

标准曲线绘制：取2.1.2项下对照品溶液，分别进样1.41μg（3μL），2.35μg（5μL），4.70μg（10μL），7.05μg（15μL），9.40μg（20μL）。以峰面积为横坐标、进样量（μg）为纵坐标进行线性回归。得回归方程为 Y=6.71×10－3+3.07×10－6X，r=0.999 9（n=5）。……