刘小青 李 玉 徐光辉 (连云港市第一人民医院肿瘤内科，江苏 连云港 222000)

乳腺癌是中国妇女近年来增长幅度最大的恶性肿瘤之一。Ki67是较为肯定的核增殖标志，其表达、变化可反映肿瘤的增殖活性〔1〕。血管内皮生长因子(VEGF)在肿瘤组织血管形成中发挥重要作用，与肿瘤生长、浸润和转移密切相关，本研究用SP免疫组化法检测乳腺癌组织及乳腺良性病变中Ki67及VEGF的表达，探讨其与临床因素之间的相关性及临床意义。

1 材料与方法

1.1 标本及主要试剂 所有49例标本均来自本院2007年5月至2008年9月住院拟手术的病人，入院前均无放化疗治疗史，并取得患者同意签署组织样本使用同意书。其中Ⅰ期13例，Ⅱ期24例，Ⅲ期12例，并设乳腺良性疾病对照20例。Ki67、VEGF一抗及SP试剂盒均购自Ⅰnvitrogen公司;

1.2 方法 石蜡切片常规脱蜡，高压煮沸2 min进行抗原热修复处理，3%H2O2孵育5 min以消除内源性过氧化物酶的活性，PBS冲洗 3 min/3次，加入一抗 Ki67、VEGF，4℃过夜，PBS冲洗3 min/3次加入二抗孵育1 h，PBS冲洗，加DAB显色，自来水充分冲洗，梯度酒精脱水，二甲苯透明，封片。阳性结果呈棕黄色或棕褐色颗粒，不同生物学指标在细胞中的着色部位不同，Ki67及VEGF阳性细胞分别为细胞核显色和细胞质显色，Ki67、VEGF切片随机观察5个中倍视野(×200)，每个视野计数200个细胞，将各视野中阳性细胞的平均百分比作为该切片的阳性细胞百分比。

1.3 统计学方法 采用SPSS12.0统计软件 χ2检验及Spearman相关分析进行数据分析。

2 结果

2.1 Ki67、VEGF在乳腺癌组织中阳性表达 见图1。

2.2 Ki67及VEGF在乳腺组织中的阳性表达情况 49例乳腺癌标本，Ki67阳性37例，VEGF阳性者34例，而在20例乳腺良性病变组织中Ki67及VEGF阳性分别为4例及2例，乳腺癌组织中Ki67、VEGF的表达率与乳腺良性病变组织比较差异显著(P＜0.01)。……