房天琪， 邱芳萍， 王长周， 季晓枫

(长春工业大学化学与生命科学学院，吉林长春 130012)

0 引 言

蛹虫草(Cordyceps militaris)又名北冬虫夏草、北虫草等，是著名的食药用菌，具有较高的食药用价值[1]，近年来，随着野生冬虫夏草资源逐渐枯竭，价格不断上涨，人们把目光瞄准了用人工培育的蛹虫草作为冬虫夏草的替代品[2]。有研究表明，人工培育蛹虫草的菌丝体和子实体具有相似的药用与滋补功效[3]。因此，采用液体发酵获得的菌丝体代替子实体生产各种药用和保键产品成为目前冬虫夏草市场亟待解决的问题[4]。本研究通过响应面分析法与PB实验相结合的方法，以菌丝体生长量为响应值[5]，采用多元二次回归拟合方程[6]，并通过求偏导获得了主要影响因子的最佳浓度配比[7]。蛹虫草液体培养进行优化试验研究，对虫草产业发展具有一定的理论与实际意义[8]。

1 实验材料

1.1 菌种

蛹虫草菌(Cordycepsm ilitaris)，由吉林蚕业研究所提供。

1.2 斜面培养基组成

每1 L培养基中含有:马铃薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨 20 g，KH 2 PO4 1.0 g，MgSO4◦7H 2O 0.5 g，琼脂20 g，pH自然。

1.3 种子培养基

每1 L培养基中含:土豆200 g，胡萝卜200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨20 g，KH2PO41.0 g，MgSO4◦7H 2O 1.0 g，维生素B1 1.0 g。

1.4 试剂

其它试剂均为分析纯，长春金星化学与生物制剂有限公司购买。

2 实验方法

2.1 培养方法

将制备的供试液体培养基各取100 m L，分别装入250m L的三角瓶中，经高压蒸汽灭菌，在无菌操作台上接入1块0.5 cm2菌种块，放入恒温振荡培养箱中，在25℃，150 r/min的条件下振荡培养3 d，得到带有菌丝体球的种子液，以一定接种量转接至发酵培养液中，相同条件下培养2 d，得发酵液。……