孔晓明，刘勇

蚌埠医学院微生物学教研室，安徽省感染与免疫重点实验室，蚌埠 233030

自然杀伤T细胞(natural killer T cell，NKT细胞)是一类介导天然免疫和获得性免疫的免疫细胞，它们既表达T细胞受体(T cell receptor，TCR)，又表达NK细胞表面标记CD161(NK1.1)。NKT细胞能特异性识别非经典的主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex，MHC)Ⅰ类样分子CD1d呈递的脂类抗原和蛋白质抗原，活化后的NKT细胞能同时分泌T辅助细胞1(T helper cell type 1，Th1)和Th2两类细胞因子，包括白细胞介素2(interleukin 2，IL-2)、IL-4、γ干扰素(interferon γ，IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)等，同时激活下游多种其他免疫细胞，如树突细胞(dendritic cell，DC)、NK细胞、巨噬细胞、T细胞等，进而调节机体多种免疫效应[1]。大量研究表明，NKT细胞在抗胞内菌的感染免疫中发挥着重要作用。

1 NKT细胞的生物学特征

1.1 NKT细胞的分型

NKT细胞可分为Ⅰ～Ⅲ型：Ⅰ型NKT细胞大部分属CD4+和CD4-CD8-一类，主要特征为CD1d限制性，TCR多样性有限，只表达1条恒定的Vα14-Jα18链(小鼠)或Vα24-Jα18链(人)和1条Vβ链﹝包括Vβ8.2、Vβ7、Vβ2(小鼠)和Vβ11(人)﹞；Ⅱ型NKT细胞也表现为CD1d限制性，但表达多种TCR Vα链；Ⅲ型NKT细胞是CD1d非依赖性的，表达多种TCR Vα链，也称NKT样细胞[1]。

1.2 NKT细胞的检测方法

目前对NKT细胞表型的确定仍存有争议。常借助NK细胞谱系标记(小鼠为NK1.1，人为CD161)及TCRα/β共表达来界定NKT细胞。常用CD161(人)与TCRα/β共表达、NK1.1(仅C57BL/6小鼠表达)与TCRα/β共表达、DX5(NK1.1-小鼠)与TCRα/β共表达来标记。CD1d四聚体的出现对 Ⅰ 型和 Ⅱ 型NKT细胞的研究起了极好的推动作用。α-半乳糖神经酰胺 (α-galactosylceramide，α-GalCer)分子是目前与NKT细胞结合效能最强的糖脂抗原，能最大限度刺激NKT细胞产生Th1及Th2细胞因子[2]。应用此糖脂及CD1d建立的CD1d四聚体技术已成为目前检测NKT细胞的“金标准”[3]。但Ⅲ型NKT细胞即NKT样细胞，是CD1d非依赖性的，目前多采用DX5与TCRα/β共表达来界定。……