高 艳 张险峰

(1黄石理工学院医学院,湖北黄石 435003; 2黄石市中心医院消化内科,湖北黄石 435000)

结肠癌是消化道常见恶性肿瘤,主要死亡原因是肿瘤的浸润和转移。结肠癌的侵袭和转移的发生是一个多基因、多因子共同作用的结果,主要涉及多种相关癌基因的激活和(或)转移抑制相关基因的失活。本实验采用免疫组化法检测c-erb B-2、bcl-2和nm23蛋白在结肠癌组织中的表达,并分析其与结肠癌各临床病理参数的关系,以期阐述其在结肠癌的发生发展和浸润转移中的作用。

1 材料与方法

1.1 资料

1.1.1 标本

收集 2007年 -2010年黄石市中心医院 45例结肠癌患者行根治手术切除获得的结肠癌组织标本。45例结肠癌患者中男 27例,女 18例,年龄(47.5±16.2)岁;TMN分期采用美国癌症联合委员会标准。本组病例术前均未行化疗和放疗;所获标本均经 10%甲醛固定,石蜡包埋,4μm连续切片,HE染色证实为结肠癌。

1.1.2 主要试剂

兔抗c-erb B-2单克隆抗体购自Santa-Cruz Biotechnology公司,bcl-2抗体购自福建迈新生物公司,nm 23抗体购自博士德公司, S-P试剂盒、DAB试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。

1.2 方法

采用免疫组化S-P法检测45例结肠癌组织中c-erb B-2、bcl-2和nm 23蛋白的表达,实验步骤严格按照说明书进行。并用已知结肠癌标本作阳性对照,以PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判断

c-erb B-2以细胞膜或细胞浆呈棕色颗粒为表达阳性,bcl-2以细胞浆或细胞膜染成棕黄色为阳性,nm 23蛋白染色均以细胞质内呈棕黄色或黄色颗粒且明显高于背景者为阳性。采用双评分半定量法评分:＜25%细胞阳性为 0分,25% ～50%细胞阳性为 1分, 51%～75%细胞阳性为 2分,＞75%细胞阳性为 3分。……