朱海霞 陈礼明 陈姿如

百草枯又名克无踪、对草快，属高效有机杂环类接触性除草剂与脱叶剂。目前临床上多采用血液定量、尿液定性的方法检测百草枯，尿液定量检测百草枯方法少见报道[1]。本文介绍一种快速、简便的百草枯尿液定量检测方法。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 722分光光度计（山东鲁南瑞虹化工仪器有限公司），离心机；无水碳酸钠、碳酸氢钠、连二亚硫酸钠（保险粉）均为分析纯，20%三氯醋酸。

1.2 标准曲线的绘制 以市售百草枯（20%，即200 g/L）为标准，用去离子蒸馏水稀释为40 mg/L百草枯标准贮备液。取贮备液0、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1.0 mL分别于8只玻璃试管中，加蒸馏水2.5 mL和正常尿液2.5 mL混匀，百草枯质量浓度分别为0、0.4、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0和8.0 mg/L，加固体无水碳酸钠0.5 g和碳酸氢钠0.2 g，混合使其溶解，使其pH>9.0，加固体连二亚硫酸钠0.3 g混合溶解呈蓝色，722分光光度计比色，波长396 nm，1 cm比色杯，以水为参比测定吸光度，平行操作3次取均值，以测定管吸光度减去空白管吸光度为Y值，百草枯浓度为X值求得标准曲线及回归方程。

1.3 样品测定 取2只10 mL玻璃试管分别称为V和B管，各加患者尿液2.5 mL，蒸馏水2.5 mL，加固体无水碳酸钠0.5 g和碳酸氢钠0.2 g，混合使其溶解，pH>9.0，V管加固体连二亚硫酸钠0.3 g混合溶解显蓝色。以水为参比，用722分光光度计分别对2管进行比色，波长396 nm，所得尿液空白吸光度视为AB,尿液测定管吸光度视为AV，（AV-AB）通过回归方程或查标准曲线得到的值乘以2即尿百草枯浓度。

2 结果

（1）线性关系和检出限。百草枯浓度在0～5.0 mg/L线性关系良好，r=0.999 2，回归方程Y=0.182 3 X+0.002 7，方法检出限为0.10 mg/L，尿样最低检出浓度为0.10 mg/L。（2）方法的精密度。用健康查体者混合尿液配制0.5、2.0、10.0 mg/L低、中、高百草枯样品，分别进行6次重复试验，计算方法的精密度，其相对标准差（RSD）分别为5.0%、4.2%和4.8%。（3）方法的回收率试验。用正常人尿液配制0.5、5.0和10.0 mg/L共3种百草枯样品浓度，分别进行6次重复试验，计算方法的回收率为95.5%～102.3%。其RSD分别为4.6%、3.2%和4.7%。（4）尿样本底颜色的干扰。尿样颜色呈浅黄色、褐色，深浅差别较大，在396 nm有较大的吸光度，百草枯中毒后的患者因尿液胆红素增高，尿液更易变黄。（5）显色稳定性。加入显色剂连二亚硫酸钠后，其蓝色会随着时间的延长而褪色。

3 讨论

采用722分光光度计比色法检测尿液中的百草枯对诊断和治疗百草枯中毒有重要意义，百草枯主要以原形从肾小球和肾小管滤过排泄。尿液中百草枯的量相对较高，有时当血样中已检测不到时，尿液中仍能检测到，所以检测尿液中百草枯可作为是否需要血液灌流或透析的重要指标；笔者将用到的固体试剂无水碳酸钠、碳酸氢钠及连二亚硫酸钠称量包装于带盖的塑料样品杯中，方便使用，若配制成液体试剂，则不呈蓝色反应；本法不需要昂贵器材设备，简便快速，灵敏度高，一般接到样品后10 min即可发出报告；线性试验、精密度试验和回收试验结果也显示该方法能够满足临床需要。

[1]孙世义,王翠,罗晓芳.分光光度法快速测定尿中百草枯[J].中国卫生检验杂志,2008,18（5）:819-874.