咖啡酸苯乙酯对糖尿病大鼠视网膜VEGF和ICAM-1表达的影响
2011-03-13臧婵媛刘学政
袁 鹏 臧婵媛 周 伟 刘学政
糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病最具破坏性的眼部并发症,DR可对视力造成不可挽回的影响,早期预防和治疗DR成为研究者关注的热点。咖啡酸苯乙酯(CAPE)是一种从蜂胶中分离出的酚类物质,具有抗炎、抗氧化应激和免疫调节作用,为一种有效的特异性核因子(KF)-κB抑制剂[1]。糖尿病状况下,升高的炎性介质、活性氧化产物和糖基化终末产物可作为细胞外信号进一步激活NF-κB[2]。本实验旨在研究CAPE对糖尿病大鼠视网膜细胞间黏附因子(ICAM)-1和视网膜血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响,以期观察CAPE在治疗DR中的药理作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物及材料 雄性清洁级SD大鼠40只,体质量200~220 g,购自辽宁医学院实验动物中心,于温度为25℃、湿度为40%的动物房普通饲料喂养。链脲佐菌素(STZ)购自Sigma公司,CAPE购自美国IL公司,VEGF和ICAM-1酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒购自武汉博士德公司;One TouchⅡ血糖测定仪购自美国强生Lifescan公司,超声波细胞破碎仪(VCX105型,Sonics&materials公司),离心机(1-14型,Sigma公司),酶标仪(DNM-9606型,北京普朗新技术有限公司)。
1.2 模型制备与分组 大鼠禁食12 h后,按45 mg/kg尾静脉注射1%STZ溶液[0.1 mol/L的柠檬酸和柠檬酸钠缓冲液(pH 4.5)配制];48 h后尾静脉采血测血糖,以后每月测1次,将血糖浓度大于16.7 mmol/L的大鼠定为糖尿病模型大鼠。取30只糖尿病模型大鼠随机分为3组,每组10只:DM组不使用任何药物,CAPE5组按5 mg/kg每3 d腹腔注射CAPE,CAPE10组按10 mg/kg每3 d腹腔注射CAPE,3个月后以上3组各剩下8、8、9只大鼠。另取10只SD大鼠,注射等剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液作为正常对照组(CON组)。
1.3 ELISA检测视网膜VEGF和ICAM-1蛋白水……
