冯 欣 李 垚 王雪鹰

糖尿病肾病（DN）是糖尿病（DM）最常见的严重微血管并发症，一旦肾脏受累出现持续性蛋白尿，往往不可逆转，并在较短时间内进入终末期肾功能衰竭。因此，如何更有效地延缓或阻止DN的进展，具有重要的临床意义。雷帕霉素（RAPA）是一种大环内酯类抗生素，也是安全、有效、低毒的新型免疫抑制剂。近年来动物实验发现RAPA不仅有免疫抑制作用，而且能抑制血管平滑肌增生和移行，减轻纤维化反应[1]，但是对DN的作用机制及疗效观察尚少见报道。本实验探讨了RAPA对糖尿病大鼠肾脏早期病变的影响及其作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物与分组 成年清洁级SD大鼠36只，体质量250～300 g，购自辽宁医学院实验动物中心。将36只大鼠用随机数字表法分为对照组、糖尿病模型组（糖尿病组）、糖尿病雷帕霉素治疗组（雷帕霉素组），每组12只。在造模成功后，雷帕霉素组每天予雷帕霉素1 mg/kg灌胃，对照组和糖尿病组每天予等量生理盐水灌胃，饲养至4周后处死。

1.2 方法

1.2.1 糖尿病动物模型的建立 拟造模大鼠腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ），溶于0.1 mol/L枸橼酸盐缓冲液中，pH 4.5，65 mg/kg，对照组只注射相当体积的枸橼酸盐缓冲液，48 h后尾尖取血，血糖仪测定血糖，尿糖试纸测定尿糖，血糖≥16.7 mmol/L，尿糖+++～++++者确定为糖尿病模型。实验期间动物自由进食、饮水，不使用胰岛素及其他降糖药物。

1.2.2 实验试剂 小鼠抗大鼠细胞增殖核抗原（PCNA）抗体（Santa Cruz公司）；小鼠抗大鼠Ⅳ型胶原（COL-Ⅳ）多克隆抗体（SantaCruz公司）；雷帕霉素口服液，1mg/mL（华北制药集团）。

1.2.3 大鼠血、尿生化指标的测定 每个样本取20 μL血清和20 μL尿液用日立7170A全自动生化分析仪测定血糖（Glu）、血肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和尿蛋白（UPro）。……