黄美娜 郑宇欣 于泳浩 王国林

慢性疼痛是临床常见合并症，阿片类药物是用于治疗急慢性疼痛的重要药物，除已知的不良反应外，长期应用还会导致阿片耐受和耐受相关痛觉过敏，限制了阿片类药物的临床应用。因此，阿片耐受的细胞核分子机制及临床干预手段成为近年来研究的热点。有研究表明辣椒素受体成员-瞬时受体电位辣椒素亚家族成员1（transient receptor potential vanilloid subfamily member 1，TRPV1）在吗啡耐受和耐受相关热痛觉过敏的形成中起着重要作用[1]。针刺镇痛是传统医学的瑰宝，临床实践证实电针是一种有效的镇痛手段。而对电针镇痛机制的研究已有很多，脑干下行抑制系统、阿片系统、交感神经系统均可能参与了电针镇痛过程[2-3]，但辣椒素受体的磷酸化过程是否参与了电针镇痛过程尚未明确。本文研究电针对慢性吗啡耐受大鼠行为学的影响及背根神经节内磷酸化TRPV1在其中的作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料 清洁级健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠24只，10～12周龄，体质量250～280 g，购自中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心，安静环境中饲养，自由摄食饮水，保持昼夜节律。热板、足底触觉测试器（意大利UGO BASILE公司），电针刺激仪LH202N（北京韩氏电针仪器厂）；兔抗大鼠P-TRPV1单克隆抗体（日本COSMO BIO公司）；HRP标记的羊抗兔抗体IgG（美国Cell Signaling公司）；RIPA裂解缓冲液I（上海生工生物工程技术服务有限公司产品）；电化学发光溶液（美国Millipore公司）。

1.2 动物模型建立 参照Yaksh等[4]的方法进行鞘内置管，置管24 h后，对未出现神经系统症状的大鼠经导管注入2%利多卡因20 μL，如出现双侧后肢麻痹，则证明导管位于蛛网膜下腔。……