乙型肝炎表面抗原酶联免疫吸附法中包被板的回收与利用
2011-03-13赵志钧娄海波浙江舟山医院检验中心316004
赵志钧 娄海波 于 倩 (浙江舟山医院检验中心 316004)
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)测定是诊断乙肝及乙肝病毒携带者的主要指标和直接证据之一。而酶联免疫吸附试验,因其快捷、简便,成为目前各医疗单位应用最多的检测手段。我们将日常工作中的阴性包被板条经过处理,再次用于试验,结果满意,报道如下:
1 材料与方法
1.1 仪器及材料 美国宝特(BIO-TEK)ELX-800自动酶标仪。试剂由英科创新厦门科技有限公司生产,批号2010036108。室内低值质控品(简称低值血清),英科创新厦门科技有限公司提供,批号20105101。样本HBsAg高值345U/ml、中值184.44U/ml、阴性血清0U/ml经12000RS发光仪测定,均来自本院健康检查者。
1.2 方法
1.2.1 回收板条的收集与保存 酶标板显色完全后,肉眼观察结果,不加终止液,收集阴性包被板条,用自来水洗涤5次,洗涤液洗涤1次,甩干,最后电吹风吹干,放入塑料袋内摁紧咬合条2~6℃保存。
1.2.2 样本测定 样本、室内低值质控品50μl,阳性、阴性各一滴分别加入相应的酶标板孔内,设空白对照,37℃水浴箱温育30分钟,不洗,各加酶结合物1滴,37℃水浴箱温育30分钟,洗涤、显色同原方法,显色完全后,加终止液,双波长比色,读取吸光度。计算变异系数(CV)。
1.2.3 操作方法照操作说明书。
2 结果
2.1 回收板与商品板的重复性试验比较结果 商品板和回收板的高、中、低值血清吸光度接近,且重复性良好,见表1。

表1 回收板与商品板的重复性试验结果比较
2.2 回收板不同保存时间测定结果比较 见表2。

表2 中值、低值血清、阴性、阳性、空白对照 (n=3)
3 讨论
乙肝表面抗原酶联免疫吸附试验中包被板上的包被抗体与抗原结合,再与酶标抗体结合,形成酶标记抗原抗体复合物,通过洗涤、分离,加入底物显色。……
