王拱辰,施广霞

1.大连医科大学病理生理教研室,辽宁大连 116044;2.大连第六人民医院肝病科

多数肝细胞癌的发生是继发于慢性乙型或丙型肝炎病毒感染引起的慢性炎症和肝硬化[1]。在其发生发展过程中天然免疫(innate immune response)和有适应性免疫(adaptive immune response)的激活起重要作用[2]。本实验比较了肝细胞癌患者、乙型肝炎患者血清细胞因子谱型的变化,分析其发生机制,特别关注血清IFN-γ在肝细胞癌患者免疫失衡中的作用。

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 试剂及仪器:白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、干扰素-γ(Interference-γ,INF-γ)、肿瘤坏死因子-α (Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-12P70(Interleukin-12P70,IL-12P70)定量酶联检测试剂盒购自美国Genzyme公司、美国Coulter公司、美国Boatman Biotech公司及第四军医大学免疫室提供,Bachmark酶标仪(美国)。淋巴细胞分离液(Ficoll-Hypaque,1.077 g/mL);藻红蛋白(phycorerythrin,PE)标记鼠抗人HLA-DR和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的鼠抗人单克隆抗体CD83(购自BioLegend生物公司)。

1.1.2 病例及样本的采集:2002年 4月 ～2007年 5月本院住院和门诊治疗的 54例原发性肝细胞癌患者,男 42例,女 12例,年龄 33～73岁,平均(58±15)岁,经CT、MRI、AFP和(或)肝组织病理均证实为肝细胞癌,取样前未进行任何治疗。病理分型:巨块型 19例,结节型15例,弥漫型1例;发病部位:肝右叶29例,肝左叶 2张例,肝左右叶多发 3例,本组合并肝硬化者37例(68.5%),无肝硬化者17例(31.5%),不伴门静脉癌栓者25例(46.3%),23例对照组来自正常献血员,64例慢性乙型肝炎是 2002年 4月 ～2007年 5月本院住院和门诊治疗的患者。标本收集,所有患者和对照组在治疗前后采取肝素化的外周血样本空腹 12 h采静脉血2m L,标本采集后30 m in内于2 000 r/m in,离心15min,取上层血清注入EP试管中,加盖塞紧,保存在 -70℃冰释箱中,避免反复冻融,条件相同情况下在 2周内进行检测。……