武新华,亓玉芹

1.中国人民解放军第 401医院门诊部,山东 青岛 266071;2.青岛市市立医院

肿瘤的侵袭转移过程涉及多分子作用机制和信号传导通路[1]。近年来研究发现,人富含半胱氨酸 61 (cysteine rich61,Cyr61)蛋白。在食管腺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、胰腺癌等消化系肿瘤侵袭和转移中起重要作用。Cyr61可通过NF-κB与PI3K/mTOR和MAPK依赖的信号通路促进低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducing factor-1α,HIF-1α)蛋白合成增加,从而促进胃癌细胞的侵袭性[2]。但目前国内外有关Cyr61和HIF-1α与胃癌的研究报道较少。本研究应用免疫组化检测不同胃癌组织中Cyr61和HIF-1α的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系,旨在进一步明确二者与胃癌侵袭的关系,为胃癌的诊断和治疗提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 标本来源 取青岛市市立医院普外科2008年1月 ～2009年 12月手术切除的标本共 40例,标本均经病理科两位以上的资深医师证实,术前均未接受任何化疗或放疗,且均进行了局部淋巴结的清扫。

40例标本分为 3组,分别为原发性胃癌组、配对癌旁组(距离边缘2 cm)及配对的手术切缘正常组(距离边缘5 cm以上),将胃癌手术切除标本立刻固定10%的甲醛溶液中,石蜡包埋,以备病理检查用。

1.2 主要试剂和仪器 Cyr61和HIF-1α兔多克隆抗体(武汉博士德公司)为一抗,第二抗体试剂:EnVision试剂盒购于福州迈新生物技术开发公司。染色剂:二氨基联苯胺四盐酸盐(Diamino benzidine,DAB)购于福州迈新生物技术开发公司。

1.3 实验方法和主要步骤 免疫组织化学检测胃癌组织中Cyr61和HIF-1α的表达,采用的是EnVision二步法。主要步骤如下:石蜡切片常规脱蜡水化后,浸于0.01mol/L枸橼酸溶液(pH 6.0),微波中火4min进行抗原修复。……