王彦凯，潘利敏，王凤丽，李林林，袁国栋，王月华

慢性肾脏病患者肾间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis，TIF)的严重程度较肾小球病变更为重要［1］。肾小管上皮细胞转分化(renal tubular epithelial to mesenchymal transition，EMT)在 TIF发生发展中具有重 要 作 用［2］。 转 化 生 长 因 子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是目前所公认的导致肾脏纤维化的重要因子，在 TGF-β诱导的 EMT过程中整合素连接激酶(integrin linked kinase，ILK)起重要作用。研究提示，ILK在 TGF-β1/Smad信号传导途径介导的EMT过程中扮演重要的角色，在肾间质纤维化的病程中起重要作用［3-5］。

我们在临床中用化瘀泄浊方治疗慢性肾衰竭取得了较好的疗效。同时我们在前期的实验中已经证实，化瘀泄浊方能够抑制肾小管上皮细胞转分化，并能够通过调节TGFβ1/Smad信号通路发挥对肾间质纤维化的拮抗作用［6-7］。因此，本研究进一步探讨化瘀泄浊方对肾间质纤维化大鼠ILK的影响，为进一步探讨肾间质纤维化发生、发展的机理，探讨化瘀泄浊方多途径、多靶点拮抗肾间质纤维化的治疗作用寻找实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 选用雌性、健康SD大鼠50只，体重180g±10g，清洁级，由河北医科大学动物实验中心提供(动物合格证号冀医动管字第703058号)。

1.1.2 主要试剂 兔抗大鼠ILK多克隆抗体由美国Santa Cruz公司提供。脱氧核糖核苷三磷酸(d NTPs)、核糖核酸酶抑制剂(Rnasin)、AMV逆转录酶、无离子水、GoTaq Green Master Mix、Oligo(dT)15由美国 Promega公司提供。Trizol由美国Invitrogen公司提供，溴化乙锭(EB)由美国 Sigma公司提供，琼脂糖为西班牙进口分装，DNA Marker由上海捷瑞生物工程有限公司提供。

1.1.3 实验用药 化瘀泄浊方:黄芪30g，地龙 12g，生大黄 12g，赤芍 15g，丹参 15g，槐花 15g，蒲公英15g，生牡蛎30g。由河北医科大学中医院药房提供，上药按比例称取后水煎、过滤、浓缩，装入瓶中密封备用。……