愤怒、郁怒反应模型大鼠海马5-HTR2C的基因表达
2011-02-27王杰琼张惠云
王杰琼,张惠云
(山东中医药大学中医药经典理论教育部重点实验室,山东济南 250355)
情志与健康和疾病的关系,尤其是负性情绪对健康和疾病的影响已成为当今全社会关注的焦点。中医七情中怒是负性情绪中最不可忍受、对人际关系与社会和谐影响最大、与疾病发生关系最为密切的情绪反应之一。乔明琦等[1]认为怒有愤怒和郁怒两种形式,愤怒表现为发怒后向他人发泄,郁怒表现为发怒后不发泄而郁于心中。Bridewell等[2]认为愤怒和郁怒分别对焦虑和抑郁及其相关症状产生起重要作用。为探索愤怒、郁怒诱发病证的具体机制,我们通过基因芯片技术大规模、高通量检测愤怒、郁怒模型大鼠及药物处理模型大鼠的海马基因表达,发现:愤怒、郁怒情志可导致海马多种基因的表达水平改变,本文通过RT-PCR和Western blot检测5-HTR2C在大鼠海马中mRNA和蛋白水平,从而为下一步的研究提供方向和线索。
1 材料与方法
1.1 动物及模型制备
1.1.1 动物 ♂Wistar大鼠,180 ~220 g,50 只,均由山东中医药大学实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(鲁)20050015。
1.1.2 愤怒、郁怒大鼠模型制备 愤怒大鼠模型制备采用居住入侵结合社会隔离[3]的方法,分为正常组,愤怒、郁怒模型组,经前平、经前舒给药组,每组10只。
1.2 主要试剂经前平颗粒(扬子江药业集团四川海蓉药业有限公司生产,生产批号:07102501)、经前舒颗粒(秦皇岛市山海关制药厂生产,生产批号:Z20053587)。UNIQ-10柱式总RNA抽取试剂盒(上海生工生物工程技术服务有限公司)、RNase Inhibitor(日本TOYOBO公司);RT-PCR反应试剂包括MMLVReverse、dNTP Mixture、rTaq、DNase I(大连TaKaRa生物公司)。……
