李 明 朱 芸 马晶晶 赵雪丽 (潍坊市人民医院风湿免疫科，潍坊261041)

越来越多的研究发现系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus，SLE)淋巴细胞的多克隆活化与淋巴细胞的凋亡紊乱密切相关。在细胞凋亡的调控系统中，线粒体膜蛋白的特异性抗体(APO2.7)是与Fas同族的膜蛋白，是凋亡细胞的一个早期反应。本研究通过测定SLE患者不同时期外周血淋巴细胞APO2.7的表达，探讨系统性红斑狼疮与淋巴细胞凋亡的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 SLE患者均为2003年6月～2009年3月本院住院病人，所有病例均符合1997年美国风湿病学会修订的SLE分类诊断标准，以SLE疾病活动评分(SLEDAI)判断疾病的活动度，SLEDAI≥8分为活动期，＜8分为非活动期。46例患者中女性38例，男性8例，年龄最大62岁，最小16岁，平均年龄(30.73±10.31)岁，活动期31例，非活动期15例，病程最长96个月，最短3个月。正常对照为门诊体检正常人群20名。经详细询问病史及系统查体，排除可疑带病者。两组在性别和年龄构成上差异无统计学意义。

1.2 研究方法

1.2.1 特殊试剂 藻红蛋白(PE)标记的鼠抗人APO2.7(APO2.7-PE);用于免疫阴性对照性的IgG1-PE均为美国Pharmingen生产的产品，由北京岳泰生物公司提供。淋巴细胞分离液由中国医学科学院血液研究研所生产。

1.2.2 淋巴细胞的制备 取肝素抗凝血2 ml，重层于淋巴细胞分离液上，1 500 r/min，离心15分钟，提取其中的淋巴细胞层，再用PBS洗脱2次，弃上清液备用。

1.2.3 免疫反应 取2支试管各加待测的淋巴细胞悬液500 μl(细胞数为106ml-1)，其中的一支淋巴细胞悬液管加单抗工作液20 μl，另一支加阴性对照单抗IgG1-PE，避光反应20分钟，待测。

1.2.4 流式细胞仪……