潘寿华 阎家峻 郑专

绍兴市人民医院泌尿外科，浙江 绍兴 312000

雄激素阻断是晚期前列腺癌首选治疗方法，但一般经12～18个月的治疗后会转变为雄激素非依赖性前列腺癌，患者最终往往死于雄激素不敏感癌细胞的广泛转移［1］。前列腺癌这种雄激素依赖性转化的机制目前尚不完全清楚，本研究主要从AR基因表达水平变化方面来探讨前列腺癌雄激素依赖转化的可能机制，为雄激素非依赖性前列腺癌的临床治疗提供理论基础。

1 资料和方法

1.1 临床资料

所有病例均为在本院治疗的晚期前列腺癌患者，共33例，均符合以下条件：⑴治疗前均经病理和影像学检查确诊为C或D期的前列腺癌患者。⑵均接受正规抗雄激素治疗，方法包括双侧睾丸切除或皮下注射醋酸亮丙瑞林(商品名抑那通，日本武田制药公司生产)、口服比卡鲁胺(商品名康士得，英国阿斯利康公司生产)。⑶随访期间根据需要能前后2次获取前列腺癌组织标本。根据是否发生雄激素依赖转化的标准［2］分为雄激素依赖转化组和雄激素依赖无转化组。雄激素依赖转化组：18例，年龄59～82岁，平均年龄69岁。内分泌治疗时间为13～36个月，发生雄激素依赖转化时间为12～24个月。雄激素依赖无转化组：15例，年龄60～81岁，平均年龄70岁。内分泌治疗时间为12～35个月。

1.2 RT-PCR法测定前列腺癌中AR基因表达

提取细胞总RNA，RT-PCR反应步骤：0.5 mL离心管中加入4 μg总RNA，Oligo(dT)18 μL，加DEPC处理水至12 μL，70 ℃温育5 min后取出冰浴，依次加入5×反应缓冲液4 μL，10 mmol/L dNTP 2 μL，RNA酶抑制剂1 μL(20 U)，37 ℃温浴5 min后，加1 μL(200 U)M-MuLV逆转录酶，混匀后42 ℃ 温浴1 h，70 ℃灭活10 min。PCR反应体系为2×反应缓冲液12.5 μL、引物正反义链各0.5 μL、模板DNA 2 μL以及DEPC处理水9.5 μL至终体积25 μL。……