马凤莲 刘祥朝 周艳丽

高效价冷凝集素往往是由于某些病理因素所致，其效价一般在16以上，作用的温度可达32℃。高效价冷凝集素不仅给ABO血型和Rh血型鉴定、抗体鉴定及交叉配血带来困难，同时还掩盖了具有临床意义的同种异型抗体的存在［1，2］。通过对18例存在高效价冷凝集素的标本进行多种方法的处理，解决了血型鉴定和交叉配血的困难，经输血后患者贫血症状缓解，病情好转。

1 材料与方法

1.1 一般资料 冷凝集素增高的患者18例，男15例，女3例，年龄8～85岁。其中，肾移植患者14例，感染性心内膜炎3例，慢性肺心病患者1例。效价在521～4096之间。

1.2 试剂 ABO血型鉴定试剂、Rh血型鉴定试剂均由北京金豪制药股份有限公司提供，抗人球蛋白试剂、抗体筛查试剂、谱红细胞、二巯基乙醇(2-me)应用液均由上海医药生物技术有限公司提供，ABO反定型细胞由上海血液生物医药有限公司提供。

1.3 标本采集 静脉采集EDTA抗凝血2 ml和不抗凝血5 ml。

1.4 方法

1.4.1 红细胞的处理 从抗凝管中取红细胞，将自身凝集的红细胞37℃水浴30 min，或用37℃的生理盐水洗涤3遍，洗涤后的红细胞镜检无凝集，然后做ABO正定型、Rh血型鉴定、直接抗人球蛋白试验、自身吸收试验和交叉配血;洗涤后镜下凝集的可将标本置于37℃水浴或用37℃盐水洗涤3遍，洗涤后的红细胞镜检无凝集可进行上述操作。

1.4.2 血清的处理 用二巯基乙醇处理血清，从干燥管中取出血清，加入等量的二巯基乙醇置37℃水浴40 min，取出后进行反定型、抗体筛查和交叉配血。取处理后无凝集的患者红细胞与自身血清1:1混合，置于4℃冰箱内吸收30 min，冷凝集较强的可进行多次重吸收，吸收后的血清进行ABO反定型、抗体筛查和交叉配血。

1.4.3 血清学试验 未处理的标本因血型正、反定型不一致，处理后标本ABO正反定型一致、RhD鉴定为阳性。冷凝集素效价的测定，患者血清在未稀释的情况下与O型成人红细胞发生凝集并作效价滴定，记录其效价，判定冷凝集素的特异性。

2 结果

2.1 在23℃进行ABO血型鉴定结果18例患者正定型均为AB型，反定型为O型，自身对照凝集。

2.2 处理后标本或水浴中血型正反定型结果及用二巯基乙醇处理后的血标本正反定型的结果为14例O行患者正反定型均为O型，3例B型患者正反定型均为B型，1例A型患者正反定型为A型。

2.3 18例血型物质测试均为分泌型，正定型为O型的14例患者通过血型物质检测均含有H物质，正定型为B型的均含有B、H物质，正定型为A型的均含有A和H物质。

2.4 直接抗人球蛋白试验均为阳性，抗C3 d也均为阳性，冷凝集素具有抗-I特异性。本组所作的18例患者经过冷凝集素去除后交叉配血均相合，多次输血均没有发生输血反应。

3 讨论

冷凝集素的效价低于16，在室温和37℃几乎不影响血型血清学试验，属生理性冷凝集素;病理状态下的冷凝集素是因为某些病理原因导致其效价升高，冷凝集素效价和反应温度较高会导致ABO和Rh血型鉴定、抗体效价和交叉配血困难。本文调查18例冷凝集素效价均大于16，效价在521～4096之间，室温下血型鉴定正反定型结果不一致，经过37℃水浴或洗涤后正反定型结果一致。建议在鉴定血型时遇到正反定型不符又怀疑是冷凝集素引起时，最好把标本放在37℃水浴或用37℃生理盐水洗涤3次。

IgM抗体是由5个免疫球蛋白单体通过二硫键连接起来的大分子，二巯基乙醇是巯基化合物，可灭活IgM抗体，使其亚单位间的二硫键断裂，导致IgM大分子降解而失效。同时巯基化合物又可还原IgG抗体间的二硫键，使连接重链的二硫键被打开，使IgG抗体的两个Fab片段间具有较大的舒展性。冷凝集素属分子量大的完全抗体，能直接凝集红细胞。本文18例受冷凝集素影响的ABO正反定型病例，通过二巯基乙醇灭活后使IgM抗体聚合力丧失，从而使正反定型结果一致。有资料显示，血清中的抗-A、抗-B、抗-AB抗体大多数是IgM性质的抗体，也有IgG成分，在正常献血员中，IgG1和IgG2多于IgG3和IgG4，因此IgG成分的反定型通过间接抗人球蛋白试验会得出与正定型一致的结论。刘建平等唾液、二巯基乙醇处理血清IgM、IgG效果分析显示，二巯基乙醇有对高效价的IgM去除不彻底的情况，但处理后不影响IgG效价的测定。本文结果与报道相似，所以二巯基乙醇处理后的18例血清因IgM去除不彻底而直接离心得出有A、B、O、AB血型，但不影响IgG效价的测定，所以反定型通过间接抗人球蛋白试验后会得出与正定型一致的结论。

若因高效价冷凝集素影响血型鉴定和交叉配血，最好用上述几种方法配合应用，以便输血能顺利、安全进行。本组18例患者经上述处理后，输注相合的血液后，没有发生输血反应，配血逐渐得到改善，患者病情得到缓解。

［1］林国连，詹奕荣，等.冷凝集素对血型鉴定和交叉配血的影响相关研究分析.河北医学，2010，16(3):302-304.

［2］姜燕娟，庞佳芝，张趁利.高效价冷自身抗体引起血型鉴定及配血困难1例.临床血液学杂志，2008，21(10):520.