龙 澜,帅超群

(1.湖北省农业科学创新中心鄂西综合实验站，湖北 恩施 445000； 2.恩施清江生物工程有限公司，湖北 恩施 445000)

玄参属玄参科植物玄参(ScrophularianingpoensisHemsl)[1]的根据《神农本草经》记载,玄参具有滋阴、降火、生津、凉血、解毒等功效.用于目赤、痈肿疮毒、热病伤阴、舌绛烦渴等症.现代医学研究表明，玄参还具有抗炎[2]、抗菌[3-4]、保肝用抗氧活性[5]、降压[6]、免疫促进[7]和镇痛[8]等作用.采用反相高效液相色谱法, 比较了不同产地玄参中哈巴俄苷和肉桂酸的含量, 现将结果介绍如下.

1 仪器与试药

Waters高效液相2996；Waters 2996 PD二级管阵列检测器；KQ-250D型超声波清洗器；哈巴俄苷、肉桂酸对照品(成都普思生物科技有限公司，批号：Ps08060501，Ps08092502)，色谱乙腈，去离子水，甲醇、乙酸乙酯，丙酮等试剂均为分析纯，玄参样品采自湖北巴东、湖南龙山、重庆南山、贵州道真、陕西镇平.

表1 流动相梯度洗脱比例Tab.1 The proportion of gradient in the mobile phase

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:依利特C18色谱柱(4.6×200 mm，5 μm)，流动相:乙腈，1%醋酸溶液，按表1进行梯度洗脱.

流速:1.0 mL·min-1；检测波长:278 nm；柱温:25℃，理论板数按哈巴俄苷峰计算不得低于5 000.

图1 哈巴俄苷、肉桂酸对照品 图2 玄参样品 Fig.1 The reference substance of Arpagoside and cinnamic Acide Fig.2 The sample of Figwort root and Cinnamic Acid

2.2 对照品溶液的制备

取哈巴俄苷，肉桂酸对照品适量，用30%甲醇分别配置成含哈巴俄苷300 μg/mL，肉桂酸500 μg/mL的对照品溶液.

2.3 供试品的制备

精确称取玄参药材(粉碎过4号筛) 0.5 g，置具塞锥形瓶中，精密称定，分别精密加入30%甲醇50 mL、超声波提取50 min，过滤，定容于50 mL容量瓶中，摇匀，作为供试品.

2.4 线性关系的考察

取对照品溶液,按照2.1的色谱条件, 分别进样2、5、10、20、40 μL，以峰面积(A)对浓度(C)回归分析，得哈巴俄苷标准曲线回归方程：A=15.83x+27.58,相关系数r=0.999 91；……