冯辉，冯永辉，李莹，朱晓彤，潘艳艳，曹雅明

(中国医科大学基础医学院免疫学教研室，辽宁沈阳110001)

在疟疾感染早期，以树突状细胞为主的抗原提呈细胞通过激活特异性CD4+和CD8+T细胞启动抗疟保护性细胞免疫应答。以IL-12、IFN-γ和TNF-α分泌为主的Th1型细胞免疫应答控制红内期疟原虫的爆发性增殖。随后，以Th2型细胞因子辅助B细胞分泌疟原虫特异性抗体，最终清除疟原虫［1-2］。有效地调控Th1和Th2型应答不仅能有效清除疟原虫，而且能最小限度地防止疟疾相关病理性损伤［3］。维持前炎症性免疫应答和免疫病理损伤之间的平衡有赖于Treg细胞的免疫调控作用［4］。流行区个体和鼠疟模型均已表明疟疾感染引起Treg细胞数量改变，Treg细胞比例失衡将导致抗疟免疫应答受抑制［5-6］。研究证实，Treg细胞参与抑制抗疟前炎症细胞因子应答水平［7］，但在调控体液免疫应答中的作用尚未充分阐明。前期研究显示，致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL，P.y 17XL)感染中Treg细胞参与Th1型免疫应答的调控［8-9］。为深入探讨Treg细胞在疟疾感染中的作用地位，本研究动态检测了致死型夏氏疟原虫(Plasmodium chabaudi chabaudi AS，P.c chabaudi AS)感染BALB/c和Treg细胞消除小鼠体内Th2型体液免疫应答特点，以期进一步明确P.c chabaudi AS感染中Treg细胞对Th2免疫应答的调控效应。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物、疟原虫6～8周龄，BALB/c小鼠，购自中国科学院上海实验动物中心;P.c chabaudi AS，日本爱媛大学分子寄生虫学教研室惠赠。

1.1.2 主要试剂以下单克隆抗体(mAb)均购自美国BD Bioscience:抗-CD4-FITC mAb(GK 1.5)、抗-CD25-PE mAb(PC61)和FcγIII/II封闭抗体(2.4G2)。抗-Foxp3-APC mAb(FJK-16S)和Foxp3胞内染色试剂盒购自美国eBioscience公司。

1.2 方法

1.2.1 实验动物感染和Treg细胞消除模型制备