谢 琦，李 娟，王凤山

(1.桂林医学院 生物技术学院，广西 桂林 541004;2.山东大学 药学院 生化与生物技术药物研究所，山东 济南 250012)

胸腺素α1-胸腺五肽在大肠杆菌中的表达及表达条件优化

谢 琦1，2，李 娟2，王凤山2

(1.桂林医学院 生物技术学院，广西 桂林 541004;2.山东大学 药学院 生化与生物技术药物研究所，山东 济南 250012)

目的 探讨胸腺素α1-胸腺五肽(Tα1-TP5)在大肠杆菌中的表达及表达条件优化。方法 将化学合成的Tα1-TP5基因与原核表达载体pGEX-4T-1融合并转化至E.coli BL21(DE3)，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统研究培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度及诱导时间等条件对融合蛋白表达量的影响。融合蛋白经GST琼脂糖珠亲和色谱纯化及重组肠激酶切割后，电喷雾质谱鉴定Tα1-TP5。结果 选用TB培养基，在菌体对数生长中后期加入终浓度为0.05 mmol/L的IPTG，37℃诱导5 h，GST融合蛋白的表达量最高，占菌体总蛋白的35.8%，且主要以可溶形式表达。Tα1-TP5的分子质量与理论值相似。结论 Tα1-TP5成功在E.coli中表达，并确定了最佳表达条件。

胸腺素α1-胸腺五肽;胸腺融合肽;GST融合蛋白;大肠杆菌;表达条件

胸腺素 α1(Thymosin α1，Tα1)是胸腺组分 5(Thymosin fraction 5)中分离出来的由28个氨基酸组成的多肽，是一种针对T细胞的免疫增强剂，目前被广泛应用于重度感染、肝炎和肿瘤的免疫治疗［1-2］。胸腺五肽 (Thymopentin，TP5)是胸腺生成素Ⅱ第32～36位的氨基酸残基片段，具有诱导T细胞分化、促进T淋巴细胞亚群发育并活化的功能。TP5主要用于治疗免疫缺陷、自身免疫性疾病、传染病、肿瘤和艾滋病等。由于Tα1和……