常金花，于海龙，刘翠哲

(河北省中药研究与开发重点实验室，承德医学院中药研究所，河北承德 067000）

新三黄片为本室自制，主要由大黄、黄芩浸膏、盐酸小檗碱组成，是临床上常用中成药，具有清热解毒、泻火通便之功效。其中，黄芩苷是黄芩浸膏的主要成分，也是新三黄片质量控制的指标成分之一。本实验应用高效液相色谱法测定新三黄片中的黄芩苷在大鼠血浆中的浓度，研究其在大鼠体内的药动学行为，为新三黄片的药动学研究提供实验基础。

1 仪器、试剂、实验动物

恒温水浴锅(EYELA，上海爱朗仪器有限公司），循环水式真空泵(SHB，郑州长城科工贸有限公司），自动漩涡混合器(ZH-2，天津药典标准仪器厂），Jascopump1580(日本分光公司)，Jasco-UV1575(日本分光公司)。甲醇(色谱纯，天津协和昊鹏色谱科技有限公司），乙腈(色谱纯，天津协和昊鹏色谱科技有限公司）;黄芩苷对照品(0715-200111，中国药品生物制品检定所）。Wistar大鼠(雄性），180-220g，合格证号SCXK(京)2002-0003，北京维通利华实验动物技术有限公司。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:HisQil C18(250mm×4.6mm，5μm），流 动 相:甲 醇-水-甲 酸(V:V:V，50:50:0.1），检测波长:276nm;柱温:30℃;流速:0.65ml/min;进样量:20μl。

2.2 对照品溶液的配制 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，超声助溶，甲醇定容，配制成6.4μg/ml的对照品贮备液。分别精密量取0.5ml、1.0ml、2.0ml、4.0ml、8.0ml、10.0ml贮备液至10ml容量瓶中，甲醇定容，得到不同浓度的黄芩苷对照品溶液。

2.3 空白血浆的制备 取Wistar大鼠，摘眼球取血，肝素抗凝，2500r/min离心20min，取上清液，-20℃保存，备用。

2.4 样品的处理

2.4.1 空白血浆:取空白血浆100μl，加入1mol/ml磷酸二氢钾溶液50μl，涡旋20s，依次加入甲醇100μl、乙腈350μl，涡旋5min，超声20min，3000r/min 离心15min，取上清液，40℃氮气挥干，残渣用200μl流动相复溶，14000r/min离心15min，取上清液，20μl进样。……