吴枫楠

(吉林龙谷生物科技有限公司,吉林 132101)

碱—酶法提取硫酸软骨素的工艺研究

吴枫楠

(吉林龙谷生物科技有限公司,吉林 132101)

研究以猪软骨组织为原料,采用碱液提取和酶解相结合的方式提取硫酸软骨素。通过对影响碱液提取效率和酶解效果因素的研究,确定了碱液提取的最佳条件为:碱液的体积分数7.5%、提取温度为50℃、提取时间2 h、提取2次。酶解的最佳条件为:采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的混合酶1∶1(w∶v)、添加质量分数1.0%,p H值8、提取36 h。

硫酸软骨素;碱—酶法;木瓜蛋白酶;胰蛋白酶;猪软骨

硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate,简称CS)是存在于动物软骨组织中的多种酸性多糖的混合物,主要通过共价键与核心蛋白质相连,以蛋白聚糖的形式存在。具有多种同分异构体,根据硫酸基在半乳糖上的位置不同主要分为硫酸软骨素A(CSA)和硫酸软骨素B(CSC)[1]。

硫酸软骨素具有多种生物活性。由于硫酸软骨素具有降低血脂、抗病毒、提高免疫力、抗衰老等功能,被广泛应用于临床和生物医学中。

硫酸软骨素的提取方法主要有:高温高压、中性盐法、碱法、酶解法等,本文采用碱法和酶解法相结合的办法,着重对影响提取的关键步骤进行了研究,从而得到一条优化的生产途径。

1 材料与方法

1.1 主要材料与设备

猪软骨组织(市售),活性炭,胰蛋白酶(活力1∶250),木瓜蛋白酶(活力1∶3 000),胃蛋白酶(活力1∶3 000)。

721型分光光度计:上海第三分析仪器厂; DHG-06型系列电热恒温鼓风干燥箱:武汉海声达仪器设备有限公司;HH-2数显恒温水浴锅:江苏金坛市荣华仪器制造有限公司;LD4_2A型电动离心机:北京医用离心机厂;PHS—25型酸度计:上海雷磁仪器厂;抽滤机,JA2002电子天平。……