李志君, 史锋＊, 廖祥儒

(1.食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏无锡 214122;2.江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122)

酿酒酵母线粒体NADH激酶功能相关表型研究

李志君1,2, 史锋＊1,2, 廖祥儒2

(1.食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏无锡 214122;2.江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡 214122)

NADH激酶是辅酶NADP(H)从头合成的关键途径。酿酒酵母中由POS5基因编码的线粒体NADH激酶是线粒体NADPH供应的重要来源之一。由IDP1基因编码的一种关键的NADP+依赖性脱氢酶也能够供应线粒体NADPH。通过对POS5单缺失体、IDP1单缺失体、POS5IDP1双缺失体关键的表型研究,包括它们的生长性能、温度敏感性、对非发酵性碳源的利用能力、线粒体及细胞质内代表性氨基酸的合成性能,初步解析酿酒酵母线粒体中NADPH的主要供应方式及NADH激酶在线粒体中的功能。

NADH激酶;NADPH;表型;酿酒酵母

NAD(H)和NADP(H)作为两种重要的辅酶,参与细胞内多种氧化还原反应,是生物体最重要的递氢体。前者主要涉及一些氧化性生物降解反应,后者主要参与还原性生物合成反应。除此之外,近年来的研究表明,它们还涉及多种不同的生化过程。NAD参与蛋白质的ADP核糖基化修饰,从而调控多种生化过程[1],而NADPH则参与细胞内的抗氧化防御系统,它在细胞抵抗活性氧分子(ROS)攻击的过程中处于核心地位[2-3]。基于NAD(H)和NADP(H)截然不同的生理功能,它们在细胞内的水平必然会受到严格的控制,NADH激酶就是控制它们相互转变的一种关键酶。

NADH激酶利用A TP作为磷酸供体,催化NAD+和NADH发生磷酸化,生成NADP+和NADPH。……